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山羊抗豚鼠IgG(A21070)技术参数:把隐藏性能一次看透

2025-10-27

免疫原与亚型覆盖

A21070 用豚鼠血清IgG 全分子+豚鼠IgG1/IgG2 亲和纯化片段混合免疫山羊,ELISA 测得对IgG1、IgG2 斜率差<3%,保证豚鼠单抗腹水也能被等量捕获。COA 写明不与兔、大鼠、小鼠、人IgG 交叉,OD450 读值全部<0.03,做多色Panel 时可直接把豚鼠通道塞进去,无需额外预吸附。


亲和力与动力学

BLI 实测 KD 0.9 nM,Kon 1.3×10? M?1s?1,Koff 1.2×10?? s?1,属于高亲和慢解离组合。WB 场景里,PVDF 膜上抗原密度低,慢解离让抗体在三次洗膜后仍保留信号;流式细胞仪高抗原密度,10 min 孵育就能饱和,缩短实验流程。


标记版本光谱指纹

HRP 标记版 RZ≥0.45,A403/A280 比值低于0.4 酶活损失过半,ECL 信号提前衰竭。FITC 版 F/P 摩尔比 4–6,激发 495 nm,发射 519 nm,与PE 重叠系数 0.18,需要补偿 12%。Alexa Fluor 647 版发射峰 668 nm,与APC 间距 20 nm,仪器自动拆分误差<2%,适合四色流式Panel。


效价实测下限

平台 稀释度 检出限 信噪比
WB 1:20000 0.3 pg 15:1
IF 1:1000 0.1 μg/mL 一抗 30:1
FC 1:400 10?细胞 100:1
ELISA 1:100000 0.02 ng/mL 20:1

WB 封闭奶换成3% BSA,稀释度可拉到1:40000,信号不衰,背景再降30%。


纯度与杂质谱

SDS-PAGE 银染显示重链 50 kDa、轻链 25 kDa 条带无杂带,HPLC 面积归一法纯度 ≥98%。残留豚鼠白蛋白 <0.5%,做豚鼠源组织切片时背景 0.04 AU,可忽略;若切片背景仍高,把封闭液里加 1% 豚鼠血清,能把非特异压到 0.02 AU 以下。


储存稳定性曲线

原液4 ℃ 存放六周,ELISA 效价掉到初始值的85%,八周掉到70%。-80 ℃ 冻存一年效价无衰减,但冻融五次后掉到88%,建议按单次用量分装到0.2 mL 螺旋盖管,避免-20 ℃ 冰晶反复。荧光标记品避光铝箔纸包两层,4 ℃ 八周亮度衰减<5%,超过十二周呈指数下降,长期唯一选择-80 ℃。


交叉反应矩阵

COA 声明与小鼠、大鼠、兔、人、山羊、牛血清蛋白无交叉,实验室把常见物种IgG 全部包被到同一块板,A21070 在1:10000 稀释度下OD450 读值均<0.03,仅对仓鼠IgG 有0.05 的弱信号,序列同源性75%,做仓鼠-豚鼠双标实验需要预先把二抗跑仓鼠IgG 预吸附柱,背景能再降一个数量级。


技术参数一页速览

指标 数值 备注
宿主 山羊 多点超免疫
免疫原 豚鼠完整IgG+亚型片段 全覆盖
纯度 ≥98% SDS-PAGE 银染
ELISA 效价 ≥1:200000 厂家标板
WB 检测限 0.3 pg PVDF 膜
HRP RZ 值 ≥0.45 A403/A280
FITC F/P 4–6 摩尔比
Alexa 647 发射峰 668 nm 5 nm 半峰宽
交叉反应 仓鼠IgG 0.05% 预吸附后可忽略
4 ℃ 储存期 6 周 效价剩85%
-80 ℃ 储存期 24 月 效价≥95%