公司动态
 
首页 > 公司动态  >  驴抗绵羊IgG(A21060)选购指...

驴抗绵羊IgG(A21060)选购指南:用错二抗,整个多色Panel直接翻车

2025-10-27

宿主选择决定串扰上限

多色流式里常见的“山羊-驴-兔”三角组合,山羊和驴血清蛋白同源性高达82%,交叉足以让补偿值飙到15%。A21060 宿主是驴,专配绵羊一抗,天然避开山羊背景,染人外周血时CD3-绵羊抗人+驴二抗组合,山羊通道背景直接从1.2%掉到0.05%,一次就把补偿参数砍半。


亚型识别谱写进证书

绵羊IgG 只有IgG1、IgG2、IgG3 三个亚型,A21060 用混合亚型免疫,ELISA 斜率差<5%,做单羊克隆抗体也能全覆盖。证书里给出IgM 交叉OD450 0.08,IgA 0.06,真做绵羊源腹水时,先把IgM/IgA 用层析去掉,二抗稀释度可再下探一倍,信号依旧线性。


标记版本怎么配激光

FITC 版本适合488 nm 激光,但发射峰519 nm 与PE 重叠系数0.18,需要补偿12%。换成Alexa Fluor 488,重叠系数降到0.09,补偿只要4%,多色Panel 直接省一个通道。做全光谱流式,选A21060 Alexa Fluor Plus 647,激发633 nm,发射668 nm,与APC 间距20 nm,仪器自动拆分误差<2%。


效价与稀释度实测表

应用 推荐稀释 实测下限 信噪比
WB 1:20000 0.5 pg 12:1
IF 1:1000 0.1 μg/mL 一抗 25:1
FC 1:400 10?细胞 80:1
ELISA 1:100000 0.02 ng/mL 15:1

WB 场景里把封闭奶换成3% BSA,稀释度可拉到1:40000,信号不衰,背景再降30%。


冻干粉 VS 液体怎么选

冻干粉运输不怕升温,复溶后浓度误差±2%,适合海外长途。液体版加50% 甘油,-20 ℃ 仍液态,即取即用,适合高通量平台。冻干粉复溶后4 ℃ 只能放六周,液体版分装-80 ℃ 两年效价无衰减,年用量>20 mL 直接选液体,省复溶步骤,减少一次污染风险。


预吸附级别看穿字母

A21060 后缀带“min X”表示经过多重预吸附,X 列表里写“Goat, Mouse, Rabbit, Human”,交叉OD 全部<0.02。没写“min”的基础款只做了山羊预吸附,人IgG 交叉OD 0.08,做人源组织多色时背景直接爆表,差价10% 换来背景降一个数量级,预算够直接上min X。


价格梯度与渠道

国产分装100 μL 180 元,原装进口1 mL 1600 元,中间价差主要在批间一致性。发文章需要写货号,原装批间CV<5%,审稿人追问也能拿出COA。筛选阶段用分装,先跑一批效价标定,数据稳定再锁原装,能省30% 预算。大宗签年度价,每季度锁一次,关税运费再降8%。


避坑速查清单

  1. 把驴抗绵羊错当山羊抗绵羊,补偿参数全乱
  2. 用PBS 稀释FITC 版,pH<7 亮度掉20%,换pH 7.4 缓冲
  3. 冻干粉复溶后没离心,絮状颗粒堵流式进样针
  4. 液体版反复开盖,甘油吸潮浓度降,效价同步下滑
  5. 多色Panel 里同用Donkey anti-Mouse,宿主相同导致竞争,信号此消彼长