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IgG1 蛋白选购指南:从命名到批次,一次看懂
2025-10-24
命名迷宫:Immunoglobulin G1 到底叫什么
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Immunoglobulin G1、IgG1、IGHG1 是同一基因座产物,区别只在语境
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Ig Gamma-1 Chain C Region 强调“恒定区”蛋白片段,常用于重组表达
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G1m Marker、Immunoglobulin Gm1 属于血清型标记,做人源化抗体或疫苗评价时才需要检测
→ 采购前先在 COA 里核对“品名”与实验目的,避免把“全长 IgG1”买成“Fc 片段”
天然 vs 重组:宿主决定糖型
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人血清来源 IgG1:糖链以 G2F 为主,CDC 活性高,但批次差异 ±20 %
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CHO 表达重组 IgG1:核心岩藻糖低,ADCC 易放大,适合细胞治疗研究
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HEK293 版本:半乳糖偏高,抗原结合活性接近人源,价格贵 30 %
→ 做功能实验优先选“宿主与目标一致”的糖型,写进实验方案方便审计
纯度指标:别只看 95 %
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SDS-PAGE 仅测重链+轻链总量,看不见聚集体
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SEC-HPLC 要求单体 ≥ 98 %,聚集体每增加 1 %,小鼠半衰期缩短 6 h
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残留 Protein A 必须 ≤ 10 ppm,否则人血清会出抗试剂抗体
→ 向供应商索要“SEC 图谱+Protein A ELISA 报告”,拒绝只有紫外吸收图的批次
亚类对照:为什么选 IgG1 而不是 IgG2
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人 IgG1 与 FcγRI 结合力 10^7 M^-1,高于 IgG2 两个数量级,适合 CDC 实验
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IgG1 铰链区较长,易被 IdeS 蛋白酶切割,做片段化实验更省酶
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若研究中性粒细胞吞噬,IgG1 的糖型-受体匹配度最好,背景低
→ 确认实验终点是“补体裂解”还是“细胞吞噬”,再决定买 IgG1 还是 IgG2 对照
包装规格:冻干粉 vs 液体
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冻干粉 10 mg 瓶装:复溶后浓度误差 ±5 %,适合长期储备
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液体 1 mg×10 支:免稀释,减少污染,适合 GMP 细胞培养
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同一货号不同规格,价格差 15 %,按“一次实验用完”原则选剂型,避免反复冻融
→ 查说明书“复溶后稳定性”条目,若写 4 °C 仅 7 天,就选液体支装
批次间控制:把 CV 压到 3 % 以内
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要求供应商提供“三批混样”电泳图,轻/重链比值偏差 ≤ 0.05
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自留 50 μg 小管,与下批次做 HPLC 叠加图谱,保留差异证据
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若做临床前毒理,提前锁定 3 批大包装,避免中期换批
→ 合同里写“批次变更需提前 30 天书面通知”,否则退货
运输与存储:忽视温度窗口=活性腰斩
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冻干粉 2-8 °C 运输即可,-20 °C 长期保存,禁止自动除霜冰箱
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液体剂型干冰运输,收到立刻分装,-80 °C 可存 24 个月
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反复冻融 3 次,Fc 区氧化增加 12 %,与 FcRn 亲和力下降 8 %
→ 收到快递当天拍温度记录,超 8 °C 直接拒收,照片留证
价格陷阱:单位换算看清“$ / mg”还是“$ / kDa”
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某些平台把 150 kDa 的 IgG1 按摩尔报价,看似 100 美元便宜,折算下来 1.5 倍价
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对比时统一换算到“每毫克纯蛋白”,再算运费和关税
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大宗 500 mg 以上可签“CIF 实验室”条款,清关时间从 15 天缩到 5 天
→ 让财务按“到货实际称重”付款,避免水分蒸发带来的 3 % 损失
文件包:审计时少一张证书就停摆
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COA、MSDS、原产地证、TSE/BSE 声明四件套缺一不可
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若用于 IND 申报,再要“细胞库检定报告”和“病毒清除验证”
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电子版先预审,纸质原件随货同行,丢失不补
→ 建立文件夹命名规则“货号_批次_到货日期”,审计员 5 分钟能找到