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Aβ1-42 检测试剂盒选购指南:把钱花在刀刃上

2025-10-23

1. 先认分子:Ab1-42、Aβ1-42 是同一根肽链

Amyloid β Peptide 1-42 简称 Aβ1-42,早期文献偶见 Ab1-42,二者指代 42 个氨基酸的淀粉样β肽,序列一致。采购时若看到抗体标“Anti-Ab1-42”,让供应商出具免疫原序列截图,确认 C 端终点为 Ala42,避免把 40 肽抗体错下单。

2. 选平台:ELISA、Simoa、MESO 谁更稳

  • ELISA:灵敏度 10 pg/mL 足够区分老年认知正常与 MCI,一台酶标仪 3 万元可开工,适合预算 10 万以内的课题组。
  • Simoa:单分子阵列把 LoD 压到 0.04 pg/mL,脑脊液 100 倍稀释后仍可测,适合早期 AD 筛查项目,试剂单价翻 4 倍,发高区论文审稿人不再质疑“低于检测限”。
  • MESO QuickPlex:电化学发光 3 重面板,一份样本同时出 Aβ1-42/1-40/p-Tau181,药企临床中心偏爱,仪器 25 万起步,需要冷链配套。

3. 抗体对决定数据生死

捕获抗体克隆 6E10 识别 Aβ 第 4-9 位aa,对 1-42、1-40 无区分;检测抗体 21F12 仅结合 C 端 42 表位,二者组合才保证特异性。说明书若写“polyclonal anti-C term”,要求提供斑点杂交验证,40 肽 10 000 pg/mL 无信号才可接受。

4. 校准品溯源:NIBSC 15/16 是锚点

WHO 人脑脊液 Aβ1-42 参考品 15/16 赋值 675 pg/mL。厂家若用内部合成肽校准,批间偏差可达 35%,数据无法跨研究。合同里写明“校准品量值可溯源至 NIBSC 15/16”,到货核对证书,缺失直接退货。

5. 基质效应:血浆 vs 脑脊液

血浆含 Aβ 结合蛋白、蛋白酶,常规稀释 2 倍仍出现 20% 抑制。选血浆专用试剂盒,配方里加 0.5% Tween-20 与蛋白酶抑制剂cocktail,回收率拉回 90–110%。脑脊液样本体积少,优先选 50 μL 用量的微孔板,减少珍贵样本浪费。

6. 包装规格算笔账

96 孔板拆条 8 孔×12 条, Cognition 队列通常 300 例,配 3 块整板最划算。若只是动物实验测 20 只小鼠,买 96 孔会浪费 70%,选 5 块独立 96 孔散装(可拆 32 孔)能把成本降到 3500 元/项目。

7. 运输温控:-80 ℃ 干冰是伪需求

合成 Aβ1-42 校准品肽在 -20 ℃ 下 12 个月降解 <5%,反复冻融 5 次才下降 15%。让供应商用 -20 ℃ 冰袋运输,省 800 元干冰费,到货立刻分装 50 μL/管,-80 ℃ 保存,实验前单管取用,足够稳定。

8. 质检报告读 3 行

  • LoB/LoD:LoB 0.3 pg/mL、LoD 0.9 pg/mL 代表空白限与检测限,血浆背景 5 pg/mL 时 S/N 仍 >5,数据可信。
  • CV%:批内 CV 4%、批间 CV 8% 是及格线,超出即判为不稳定。
  • 回收率:80–120% 外,看 3 个浓度点是否等距偏移,若仅低值点偏低,提示高剂量 Hook 风险。

9. 售后支持:不只是换货

仪器读数跳孔,90% 是板底气泡。优质供应商提供远程视频排查,5 min 内指导重新离心样本、调整洗板机压力,避免一次实验报废。合同里写“技术支持 2 h 响应”,真能救命。

10. 砍价策略:科研价 vs 临床价

药企临床中心采购量大,可压 35% 目录价。高校课题组拿 30 万预算书,先报“预估 3 年 800 块板”,供应商通常给科研 25% 折扣,再加赠 1 套校准品,折算后每块板省 400 元,足够发两篇 5 分文章。