同一瓶 2.5S NGF，不同批次 EC50 差距 3 倍，PC12 细胞分化率从 85 % 掉到 40 %. 下面 6 张硬参数卡把比活性、内毒素、宿主蛋白、SEC-HPLC 纯度、ED50 漂移、运输稳态一次写死，采购单照抄即可通过 NIH 3T3 细胞库审计。

1. 比活性 ≥ 5 × 10^5 IU/mg，低于此值直接退货

WHO 3rd IS 18/164 标准定义 1 IU = 1 ng 重组人 Beta-NGF. 厂家 COA 若写 2 × 10^5 IU/mg，说明 1 mg 只含 200 μg 有效蛋白，其余为宿主杂蛋白。下单前把单位换算成行：

“IU/mg ÷ 10^6 = μg 有效 NGF/mg 粉末”，数值 < 0.5 就换供应商，避免 PC12 铺板 48 h 后突触长度不达标。

2. 内毒素 ≤ 0.1 EU/μg，高于 0.5 EU/μg 诱导小胶质细胞假炎症

Beta-NGF 本身无 TLR4 活性，内毒素污染会让原代小胶质细胞释放 TNF-α，背景信号盖过神经突生长。收货当天取 10 μL 原液用 LAL 法复测，读数 > 0.5 EU/μg 立即退回，防止一批实验被误判为 NGF 促炎效应。

3. SEC-HPLC 纯度 ≥ 97 %，二聚体峰面积 < 2 %

活性形式是非共价二聚体，但储存中易形成共价二聚体，SEC 保留时间 11.8 min，比单体 13.2 min 早 1.4 min。峰面积 > 3 % 时 EC50 漂移 1.8 倍，COA 必须附 SEC 图谱，二聚体积分红笔圈出，超 2 % 拒收。

4. ED50 漂移范围 ≤ ± 15 %，同批次前后测试双样

TF-1 细胞增殖法测 ED50，标称 0.5 ng/mL，批次内双样 CV 必须 ≤ 15 %. 到货后随机抽 1 管做 5 点稀释，用 GraphPad 四参数拟合，ED50 落在 0.43-0.58 ng/mL 算合格，超界就把整盒 10 管退回，避免 96 孔板边缘效应放大误差。

5. 宿主蛋白残留 ≤ 50 ppm，E.coli 系统需加 HCP 检测

E.coli 表达系统常带 OmpA、GroEL 杂蛋白，HCP 残留 > 100 ppm 会激活髓系细胞 CD14 通路。COA 附 ELISA 数据，靶值 < 50 ppm；无 HCP 项就要求加测，费用 120 USD，比重做髓系实验便宜 20 倍。

6. 运输稳态：干冰剩量 ≥ 2 kg，箱芯温度 -78 °C 连续记录

Beta-NGF 在 -20 °C 以上 24 h 活性掉 8 %. 物流箱贴 USB 温度记录器，收货后导出 CSV，曲线任何一点 > -70 °C 即视为失活，拍照留证走理赔。把温度轨迹 PDF 附在实验记录，审计官不再要求补活性测试。