瓶身只写“IgG2α”三个字符，有人收到 250 mg 高纯度 Fc，有人拿到的是 50 kDa 片段还混 IgG1。差距不在运气，在有没有把选购流程拆成可签字的验收单。下文给出决定 IgG2α 能否一次买到可用材料的 5 条硬杠杆，每条都附带当场能做的验证方案，照单执行，返工率直接归零。

1. 基因坐标：IMGT 编号 CH1 必须起始于 EU 99 位

小鼠 IgG2α 恒定区 IMGT 登录号 J00470，CH1–CH3 对应 99–327。

• 供应商若提供“IgG2a (97–327)”说明把前导肽算进去，表达后 N 端会多出两个 Gly-Ser，蛋白 A 亲和常数掉 30%。
• 验收：让对方发 FASTA，首氨基酸必须是 Glu99，出现 Gly97 直接退货。

2. 铰链区 Cys 数量：四对二硫键缺一就会出 75 kDa 肩峰

IgG2α 铰链区比 IgG1 多一对 Cys，还原 CE-SDS 应只出现 55 kDa + 25 kDa 两条带。

• 参数：非还原 CE-SDS 150 kDa 主带 ≥ 98%，75 kDa 肩峰 < 1%。
• 出现 75 kDa 说明表达温度 > 32 °C，要求厂家把降温工艺写进 COA，否则拒收。

3. 内毒素：小鼠体内实验 0.1 EU/mg 是红线

IgG2α 等电点 7.4，正电荷区域多，易吸附内毒素。

• 动态浊度法：1 mg/mL 样品，阳性 0.25 EU/mL，3600 s 内浊度上升斜率 < 阳性 40% 算合格。
• 超限可用膜吸附法一步降到 0.05 EU/mg，回收率 90%，成本只增 6%。

4. 糖基化占位：N297 必须岩藻糖化， afucosyl < 5 %

小鼠 IgG2α 只有 N297 一个糖位点， afucosyl 比例升高会假性增强 ADCC。

• 参数：LC-MS 糖肽法， afucosyl 峰面积 < 5%。
• 实测 6–10% 可要求厂家改用 FUT8 过表达株再生产，批间差可压到 2%。

5. 运输缓冲液：pH 5.2 蔗糖配方 45 °C 7 天聚集体 < 1 %

夏季运输舱温常冲 45 °C，PBS 里 7 天聚集体能飙到 8%。

• 配方：20 mM 柠檬酸、150 mM NaCl、5 % 蔗糖，pH 5.2，蛋白 20 mg/mL。
• 验证：SEC-HPLC 45 °C 7 天，主峰下降 ≤ 1%，二聚体 0 %。不合格批次直接退回，厂家会免费换成精氨酸-谷氨酸体系再发货。