名字三个写法,收货只认一个货号,别让 CD4 迁移距离差 30% 才回头找原因
NCC-4、HCC-4 都是早期文献叫法,UniProt 官方符号 CCL16。采购单、发票、质量证明三处名称不一致,现场核查会被判“物料不明”。下单前把 UniProt 编号 O15467 写进合同,厂家发货标签必须同步,防止后期发补。
信号肽剪切后成熟肽起点第 17 位丝氨酸,E.coli 表达常把 ΔN17 版本叫“成熟型”,活性比全长高 1.4 倍,适合趋化小室实验。全长 120 aa 带信号肽,昆虫系统表达,半衰期延长 2 h,动物注射更划算。细胞实验选 ΔN17,体内研究选全长,别让多余肽段抢受体位点。
CCL16 带两对二硫键,错配一条杂带就能把 CCR1 拮抗变成部分激动。HPLC 面积归一法 ≥99%,且主峰保留时间批间差 ≤0.2 min,才算真正同质。收货先跑 RP-HPLC,梯度 5–65% 乙腈,0.1% TFA,主峰拖尾因子 >1.2 直接退货。
THP-1 对 LPS 阈值 0.05 EU/mL,工作浓度 50 ng/mL 时,内毒素 ≤0.1 EU/mg 才能把背景迁移压到 5% 以下。高于 0.5 EU/mg,细胞 3 h 自己往孔底钻,趋化指数虚高 0.8。索要 LAL 实测值,报告写“<0.1 EU/mg”却给不出数字,按 0.09 EU/mg 算体积,再评估极限用量。
部分厂商默认加 0.1% BSA 稳定剂,趋化实验觉得省事,做 SPR 的人得哭:BSA 竞争包被,信号漂移 30%。下单前勾选“no carrier”或“海藻糖-only”版本,价格通常不变,跳过透析除 BSA 的 4 h 前处理。
CCL16 工作浓度 20 ng/mL,24-well 趋化小室每孔 600 μL,一次实验消耗 12 ng。
月用量>200 μg 直接选 1 mg,避免批次差异导致 IC50 漂移。
CHO 版本在天冬酰胺 44 位带 N-糖,体内半衰期 1.8 h,小鼠尾静脉注射更持久。E.coli 无糖基,趋化活性高 15%,晶体学解析分辨率可到 1.9 ?。细胞实验选 E.coli,动物实验选 CHO,别让糖链差异导致迁移距离对不上。
WHO 92/794 每支 1000 IU,赋值 1 IU = 0.047 μg CCL16。自建标准曲线前先用 92/794 做平行标定,偏差 ≤10% 才被监管认可。缺标定记录的实验室,现场核查会被判“定量准确性无法保证”。买蛋白时同步订一支参比,避免 IU-ng 换算出错。
蛋白在 4 ℃ 稳定 5 天,厂商用蓝冰运输就能省 200 元运费。实验排期紧、周末无人收货,选干冰防止滞留升温。提前查快递路由,中转站>2 次优先干冰,别让 37 ℃ 仓库把活性烤掉一半。