公司动态
 
首页 > 公司动态  >  IL-15/IL-15R Complex:实验室...

IL-15/IL-15R Complex:实验室里的“长寿因子”选购圣经

2025-09-26

把 30 kDa 的蛋白复合物当成一台精密仪器来挑,错一步,细胞就罢工。


1. 先厘清:你买的是“复合体”还是“单体制剂”

  • IL-15/IL-15Rα 复合体(以下简称 IL-15Rc)在生理状态下以 trans-presentation 形式递呈,活性比游离 IL-15 高 50–100 倍。
  • 市面商品常把“IL-15 + IL-15Rα-Fc”混装,看似方便,其实两者在运输途中已部分解离,活性批间差 > 30%。
  • 选购红线:包装标签必须注明 pre-formed complex,且摩尔比 1:1,SDS-PAGE 下单一条带,Native-PAGE 下一条 45 kDa 主带,才能算合格复合体。

2. 活性单位别只看 pg/ml,要看“ED50 折算的 IU”

  • 不同品牌用 CTLL-2 或 NK-92 测增殖,ED50 从 0.02 ng/ml 到 2 ng/ml 都能写“high activity”。
  • 换算公式:WHO NIBSC 1st IL-15 标准品 96/556 定义 1000 IU ≈ 0.5 ng IL-15Rc。把供应商给的 ED50 代入(0.5 ng ÷ ED50) × 1000就能算出真实 IU,低于 500 IU·μg?1 直接淘汰。
  • 附带 ** phosphorylated-STAT5 报告基因实验数据**的批次,优先选,信号背景比 > 20 才稳。

3. 标签与缓冲液:两大隐形杀手

  • His×6 标签放在 IL-15Rα C 端会屏蔽与 IL-2Rβγc 的结合面,活性掉 40%;标签放 N 端影响小,但易被氨肽酶切。
  • Trehalose 与 Tween-20 组合能把反复冻融后的聚体率压到 < 5%;若缓冲液里只有 0.1 % BSA,聚体率飙到 15 % 以上,NK 细胞培养 48 h 就出现伪凋亡小体。
  • 要求 COA 里附 SEC-HPLC 聚体比例图,聚体峰面积 > 10 % 拒收。

4. 运输温度:干冰 ≠ 万无一失

  • IL-15Rc 在 ?80 °C 可存 2 年,但在 ?20 °C 只有 6 个月;干冰运输途中若出现短暂 ?10 °C,蛋白表面会形成冰晶微区,导致疏水补丁暴露,聚体率上升。
  • 选能提供 温度记录器 的物流,全程 ?65 °C 以下曲线不断档,才签字收货。

5. 分装体积算法:一次用完不回头

  • 推荐工作浓度 50 ng/ml(100 IU/ml),96 孔板每孔 100 μl 只需 5 ng。
  • 按 50 次实验算,共 250 ng;买 10 μg 包装,分 20 支,每支 0.5 μg,0.2 ml 低吸附管装 50 μl 缓冲液,?80 °C 一次冻融用完,彻底杜绝梯度稀释带来的活性衰减。

6. 现货 vs 定制:时间成本换算

  • 现货 48 h 到货,单价 ¥2800/10 μg;定制 4 周,单价 ¥1800/10 μg,但可指定 无动物源(AOF)低内毒素 (< 0.01 EU/μg)。
  • 做体内人源化小鼠,必须 AOF,否则 LPS 背景高,NK 细胞记忆数据全废;细胞系体外实验可用现货,省 30 % 预算。

7. 售后隐藏福利:活性复检券

  • 主流品牌(R&D、Bio-Techne、ACRO)提供 一次免费活性复检,把剩余 20 % 样品寄回,他们用同批次 NK-92 重测 ED50,偏差 > 25 % 直接换货。
  • 记得 30 天内用掉,逾期失效。