目录写“≥200 U/mg”用的是邻联茴香胺法,25 ℃下催化 H?O? 氧化反应,1 U 定义为 1 μmol 底物转化/分钟。换成 ABTS 法,37 ℃ 测得同一样本只有 120 U/mg。选购前先问反应体系与温度,把邻联茴香胺法当成基准,低于 150 U/mg 直接淘汰,省得回去自己换算。
MPO 含血红素辅基,A??? 吸收来自 Soret 带。A???/A??? 比值 0.75 以上说明血红素饱和,<0.6 代表辅基脱落,活性掉 40 %。到货测紫外光谱,比值不够就退货,别信“再激活”话术。
部分厂商加 0.02 % NaN? 防腐,NaN? 是 MPO 强效抑制剂,IC?? 1 μM。细胞水平检测,0.02 % NaN? 把活性压到 10 %。选购选“无防腐剂”冻干粉,用 0.22 μm 过滤除菌,损失 <5 %,比买含 NaN? 版本多做一组空白更划算。
MPO 糖基化影响体内半衰期。CHO 版本小鼠半衰期 6 h,大肠杆菌无糖版本 2 h。急性炎症模型选无糖,成本低 30 %;做长期阻断选糖基化版,减少频繁补针。目录不写糖型,直接索要 LC-MS 糖谱,给不出就换品牌。
体外实验常用浓度 50 ng/mL,96 孔板每孔 100 μL 只需 5 ng,1 mg 可跑 20 万块孔,价格 180 美元。10 mg 大包装单价比小包装便宜 30 %,但复溶后 4 ℃只能放 7 天,用不完报废。按通量下单,小包装反而便宜。
MPO 液体走干冰,温度 –78 ℃,表面水分子升华,形成玻璃态微裂纹,复溶后聚集体升到 5 %。选常温运输冻干款,聚集体 <1 %,活性无差异。急着要货选干冰,到货立即测 SEC-HPLC,聚集体 >3 % 就让厂商签赔偿协议。
同一品牌 5 批次活性 CV 8 % 被发补。要求厂商提供 3 批次平行原始数据,CV ≤5 % 写进合同,超标免费换货,避免实验重现性被拖累。
下单前把“48 小时内提供 COA、A???/A??? 光谱图、SEC-HPLC 聚集体”写进合同,超时扣 10 % 货款。厂商普遍能答应,真超时邮件催一次,附件当天就到。没写进合同,催三次才给,实验窗口已被耽误两周。