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人催乳素 ELISA 试剂盒维修保养:让 PRL 信号在 96 孔里跑满 18 个月
2025-09-12
1. 有效期不是贴纸:?70 ℃ 分装把 12 个月变成 18 个月
标准品冻干粉复溶后 4 ℃ 仅稳 48 h,?20 ℃ 反复冻融 3 次活性降 15 %。
做法:
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复溶当天按 200 μL/管分装棕色冻存管,?70 ℃ 保存,6 个月内偏差 ≤ 3 %。
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每管只融一次,用剩直接弃,避免“白天融晚上冻”的缓慢自杀。
2. 酶结合物怕光:铝箔+干燥剂双重暗室
SA-HRP conjugate 光照 2 h 活性掉 8 %,湿度 > 60 % 后 24 h 出现絮状沉淀。
现场:
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原装棕色瓶外再套铝箔袋,内置 1 g 干燥剂,湿度指示卡变粉即可继续用,变蓝立即更换。
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开瓶后 30 min 内放回 4 ℃,禁止室温“过夜散养”。
3. 板条防潮:真空封口机比拉链袋靠谱
拆封板条 25 ℃ 放置 4 h,吸附水汽后背景 OD 从 0.04 升到 0.08,低值区直接报废。
操作:
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把剩余板条放回铝箔袋,真空封口 ?0.8 bar,4 ℃ 存放 6 个月 CV 仍 < 5 %。
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拉链袋手动压封,两周后 CV 飙到 9 %,肉眼可见孔底水雾。
4. 洗板机校准:喷嘴偏移 0.2 mm=残液 10 μL
残液量每增加 5 μL,TMB 背景高 0.01 OD,低值 5 ng/mL 样本被掩盖。
月检:
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用 0.1 % 酚红溶液空洗,收集残液测 OD 550,换算体积 ≤ 2 μL/孔。
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喷嘴堵塞用 0.5 mm 通针,再 70 % 乙醇超声 10 min,流量恢复 95 % 以上。
5. 标准品衰减预警:QC 图提前 30 天报警
每天插值 QC 30 ng/mL,连续 7 次偏离靶值 > 10 % 判定校准品失效。
LIMS 模板:
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以时间为横轴,浓度为纵轴,自动生成 EWMA 曲线,权重 λ=0.2,触线即换批。
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提前 1 个月下单,避免“断档”导致整批样本重测。
6. 冰箱温度分布:角落与门口差 3 ℃
酶结合物放门口,每天开门 20 次,温度冲 8 ℃,活性 3 个月降 20 %。
布局:
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把试剂放在 2–8 ℃ 冰箱中心层,贴温度记录仪,记录间隔 1 min,超温短信报警。
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每月导出 PDF 温度轨迹,审计时直接甩给检查员。
7. 板reader灯泡寿命:LED 10000 h,卤素 2000 h
卤素灯第 1800 h 后能量下降 15 %,高值 OD 2.0 样本被读成 1.7,曲线平台区整体左移。
日志:
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每次开机记录灯使用时间,1800 h 前 100 h 预换灯,价格 200 元,比重做 200 份样本便宜。
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LED 机型无需换灯,每年做一次波长校准即可,省 2 天停机时间。
8. 废液桶污染:0.05 % 硫代硫酸钠中和 TMB
硫酸终止后 TMB 废液 pH < 1,直接倒桶腐蚀管道,蓝色残渣在 2 周后长菌发臭。
中和:
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每桶 10 L 加 50 g 硫代硫酸钠,pH 升到 6–7,蓝色褪成无色,COD 降 60 %,环保检测一次通过。
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标签写“酸性废液已中和”,检查员不再开整改单。
9. 年度大保养:把 96 孔板当成精密仪器
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洗板机:拆下 manifold,0.1 M NaOH 循环 15 min→纯水→70 % 乙醇,管路盐结晶清零。
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酶标仪:用 NIST 灰度滤光片校准 OD,偏差 > ±1 % 调增益,确保 0–3 OD 线性。
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冰箱:蒸发器除霜,门封条涂硅脂,温度分布验证 9 点均匀性 ±1 ℃。
做完把校准证书贴机身旁,审计直接打勾。