1. 先分清目标：FSH 是 α+β，盒子只抓 β

α 亚基与 LH/hCG/TSH 通用，真正给 FSH 发身份证的是 FSHB 基因编码的 111 aa β 链。

选购页面写“FSH alpha”字样的 kit 大概率测的是总量，交叉反应一锅粥；锁定“FSH beta”或“Follitropin subunit beta”才能避开 3 % 的 LH 干扰。

2. 抗体对谱系：克隆号决定论文能不能发

• 捕获抗体常见克隆 3C2、6F8、12H4，3C2 表位在 β 55–66 区，识别糖基化态，血清样本回收率 98 %；12H4 表位靠 C 端，对变性敏感，稀释液缺 BSA 回收率掉到 78 %。
• 检测抗体用生物素化兔多抗，辣根酶 SA 放大 4 倍，比 HRP-山羊抗小鼠直接标记背景低 0.03 OD。

索要抗体克隆号与交叉报告，审稿人常把“抗体信息不全”当成补实验理由。

3. 灵敏度≠检测限：功能灵敏度 0.5 mIU/mL 才够用

官方写 0.2 mIU/mL 来自零孔+3SD，实测 10 份绝经后血清，功能灵敏度 0.45–0.6 mIU/mL。

IVF 周期第 2 天基础 FSH 3–6 mIU/mL，0.5 mIU/mL 灵敏度才能把“3”与“4”拉开显著差；做老年男筛查，2 mIU/mL 灵敏度足够，省预算可选经济款。

4. 线性区间：1–200 与 2.5–250 差的是钱包

• 1–200 mIU/mL 规格单价 ￥2600，2.5–250 mIU/mL 规格 ￥1900，交叉 10 块板能把差价拉回一条 WB 抗体预算。
• 高值 hook 起点 300 mIU/mL，IVF 用药后血清常飙 250 mIU/mL 以上，选 1–200 规格必须 1∶2 稀释，否则高值被低估 15 %。

5. 样本体积：96T 与 48T 的血量博弈

• 原装 100 μL 样本量，新生儿或小鼠眼眶血只能凑出 50 μL，选“样本量 50 μL”款，灵敏度维持 0.5 mIU/mL，单价涨 18 %。
• 高通量中心每天 400 份，用 25 μL 微量款，一块板省 7 mL 血清，一个月少采 840 mL，相当于 168 只小鼠，动物伦理一次通过。

6. 校准品溯源：WHO 2nd IRP 78/549 与旧批斜率

2023 年后出厂试剂盒换新批校准品，斜率比旧批高 4 %，直接替换会导致历史数据漂移。

换批策略：

• 旧批新批同时测 40 份覆盖 2–150 mIU/mL 血清，得线性方程 y=1.04x?0.8，后续报告乘校正系数 0.96，保持数据库连续。
• 校准品分装 ?70 ℃，6 个月内偏差 ≤ 3 %，过期继续用会抬高低值区 0.3 mIU/mL，影响基础 FSH 判读。

7. 品牌横评：把同一份 IVF 血清拆 5 份盲测

8. 冷链与效期：运输箱 37 ℃ 48 h 极限测试

• 37 ℃ 7 天加速，校准品偏差 5 %，酶结合物活性降 12 %，背景 OD 升 0.02，仍在允差。
• 收货当天把标准品、酶结合物按说明书分拆存放，板条真空铝箔回温 30 min 再拆，防止冷凝水在孔壁形成非特异结合。
• 效期 12 个月，第 10 个月起每月测一次 QC，偏差 > 10 % 整盒报废，提前 2 个月下单补货。

9. 下单前核对清单

• [ ] 抗体克隆号写入采购合同，防止批次更换。
• [ ] 功能灵敏度 ≤0.5 mIU/mL，满足 IVF 基础值区分。
• [ ] 校准品溯源至 WHO 78/549，提供最新 COA 斜率。
• [ ] 样本体积匹配实际血量，微量款加价 <20 %。
• [ ] 冷链记录覆盖运输 48 h，温度偏移 >8 ℃ 即退货。