1. 检测限 ≠ 功能灵敏度：官方 0.5 mIU/mL 背后的算法

说明书写灵敏度 0.5 mIU/mL，来自 20 个零孔平均信号+3SD。真把零标准品反复测 10 次，浓度落在 0.4–0.6 mIU/mL 区间，批间波动 18 %。

实验室内部用“功能灵敏度”：连续 3 天测低值血清，CV≤20 % 的最低浓度点，多数盒子落在 1.2–1.5 mIU/mL。低于 1 mIU/mL 的数值只能当“趋势”，不能当“差异”。

2. 线性范围：1–1000 mIU/mL 的“隐形天花板”

厂家标 1–1000 mIU/mL，把 1500 mIU/mL 高值样本 1∶2 稀释回算，偏差 35 %，说明钩状效应起点在 1200 mIU/mL 左右。

现场验证：

• 取 2000 mIU/mL 血清做 1∶2、1∶4、1∶8 梯度，回算值偏差 ≤15 % 的最高稀释点即“实测上限”，多数批次只能稳到 800 mIU/mL。
• 报告高值时统一用 1∶4 稀释，把结果乘 4，避免平台区误读。

3. 特异性：CGB3、CGB5、CGB7 一锅端

抗体识别位点落在 β 亚基第 47–55 氨基酸，CGB3、CGB5、CGB7 同源性 98 %，交叉反应 100 %。

干扰实验：

• α-hCG 500 mIU/mL 掺入，测值升高 < 0.3 %。
• LH（300 mIU/mL）、FSH（1000 mIU/mL）、TSH（500 μIU/mL）交叉 < 0.1 %。
• 类风湿因子 400 IU/mL 造成假阳 12 mIU/mL，需追加 0.5 % HBR（Heterophilic Blocking Reagent）中和。

4. 精密度：批内 CV 目标 5 %，不是喊口号

实验设计：

• 1 块板内插 3 个浓度 QC（低 15、中 150、高 600 mIU/mL），各 20 复孔。
• 低值 CV 要求 ≤8 %，中高值 ≤5 %。
• 若高值 CV 超标，优先检查洗板机残液量；低值 CV 超标，多数是移液器 10 μL 刻度不准，换一次性加样槽再测。

5. 回收率：90–110 % 的金区

操作：

• 基础血清 10 份，β-hCG 浓度 < 2 mIU/mL，每份加 50、200、400 mIU/mL 标准品，体积比 9∶1。
• 回收率 88 % 提示基质蛋白吸附，把稀释液换成 5 % 胎牛血清-PBS，回收率拉到 96 %。
• 回收率 125 % 提示存在补体干扰，56 ℃ 灭活 30 min 再测，数值回落到 105 %。

6. 校准品溯源：WHO 5th IS 与旧批差值

2022 年 WHO 发布 5th IS 21/100，单位比 4th IS 高 3.2 %。

新旧换批：

• 同时用旧批试剂盒测 30 份覆盖 10–800 mIU/mL 血清，线性回归斜率 0.968，截距 2.1 mIU/mL。
• 实验室自建参考区间需乘校正系数 1.032，再发报告，避免临床误判“假上升”。

7. 稳定性：37 ℃ 7 天加速实验

数据：

• 校准品偏差 6 %，QC 低值漂移 +9 %，高值 ?3 %。
• 酶结合物活性下降 15 %，背景 OD 升高 0.025。
• 结论：运输箱温度偶尔冲 37 ℃ 不超过 48 h，结果仍可接受；超 72 h 直接报废。

8. 板间差：48 块板的大区实验

设计：

• 3 个试剂批、48 块板、6 个实验室、5 天完成。
• 统一用 30、150、750 mIU/mL 质控品，每日每板各 4 复孔。
• 结果：总 CV 6.2 %，其中批间贡献 3.8 %，日间 2.1 %，板间 1.7 %。
• 提示：多中心项目务必统一校准品批号，批间差占大头，换批即重做标准曲线。

9. 参数速查表