TGF-β1 检测值动辄 50 % 波动，七成问题不是试剂失效，而是保养断档。把实验室最常遇到的“标准曲线斜率下降”“空白 OD 暴涨”“ Hook 区前移”拆成 6 个可量化的维护节点，写进年度保养日历，一盒 2600 元的试剂能跑 90 块板，折合单孔 0.35 元，比换新品划算 8 倍。

1. 标准品冻融上限：液氮分装 12 份，每次 2 min 水浴

TGF-β1 含 9 对二硫键，冻融 4 次后还原型增加 18 %，ED50 下移 15 %。

维护动作：收到标准品立即用 0.5 mL EP 管分装 12 份，每份 20 μL，液氮速冻后 –80 ℃ 保存；用时 37 ℃ 水浴 2 min，剩余部分绝不回冻，年度消耗 12 次刚好用完。

2. 捕获抗体涂层稳定性：4 ℃ 保湿盒内 RH ≥75 %

碳酸盐包被液蒸发使抗体浓度升高，板内 CV 从 3 % 涨到 8 %。

量化指标：把微型湿度计放进 4 ℃ 冰箱，湿度 <60 % 时添加 200 mL 饱和盐水，RH 稳定在 75–80 %，涂层 12 个月仍保持 0.9 μg/孔吸附量。

3. 洗板机管路消毒：每周 0.5 % 次氯酸钠循环 20 min

生物膜一旦形成，残留体积从 2 μL 涨到 8 μL，高背景随即出现。

SOP：周五下班前排空洗液，0.5 % 次氯酸钠 350 μL/通道循环 20 min，再用超纯水冲洗 3 循环，每月一次拆洗洗头，管路菌落数 <10 CFU/mL。

4. HRP conjugate 氧化防护：分装后充氮 5 s

HRP 在 –20 ℃ 仍被慢速氧化，活性每月掉 3 %。

维护细节：把 conjugate 按 100 μL/管分装，用氮气枪充氮 5 s 赶走空气，再封膜，12 个月后活性保留 90 %，空白 OD 仍 <0.04。

5. 微孔板密封：铝箔袋 + 干燥剂 RH <30 %

潮气使聚苯乙烯板底产生静电，捕获抗体脱落 10 %。

操作：拆封后未用完的板条放回铝箔袋，加 5 g 干燥剂，封口机 3 s 热封，湿度指示卡 <30 % 蓝色为准；年度检查 3 次，无干燥剂的对照板 CV 已升至 7 %。

6. 年度校准：ED50 漂移 >15 % 即淘汰

用母液浓度 500 pg/mL 做中间点，每季度跑一次四参数曲线。

警戒值：ED50 漂移 10–15 % 时，把标准品、conjugate、板条同时换新；漂移 >15 % 直接报废整盒，避免后续 30 块板数据被审稿人质疑。

把 6 条动作写进实验室年度保养日历，每季度 30 min 巡检，一盒试剂可稳定跑 90 块板，单孔成本 0.35 元，比频繁换新盒节省 8 倍预算。