IL-17A 在胶原诱导关节炎 (CIA) 滑膜液里 6 h 就能冲到 800 pg/mL，可同一批血浆用不同盒子复测，结果能差 30%。价差来自技术参数暗线。拆成 8 张刻度尺，每尺给边界值，拿到 COA 直接打分，15 min 判定货号能不能跑关节炎、EAE 或哮喘模型。

1. 捕获表位：锁定 24–155 aa，跳过信号肽与前体

IL-17A 前体 1–23 aa 为信号肽，分泌后切除；成熟分子从 Ala24 起始。

核对句：说明书 Immunogen 写 "recombinant rat IL-17A (Ala24–Ala155)" 或 "mature region 24–155" 才识别分泌型；出现 "1–155 full length" 把胞内前体算进来，脾细胞裂解液虚高 20–40%。

2. 功能灵敏度：1 pg/mL 只是 "理论空白+2SD"

厂商用 20 个空白孔均值+2SD 给出 1 pg/mL，实际血浆里中性粒细胞胞外陷阱 (NET) 能把背景抬高 3 倍。

实测：6 份正常 SD 大鼠血浆加 1、3、9 pg/mL 标准品，回收 80–120 % 的最低浓度即为功能灵敏度。≤3 pg/mL 的批次才能测正常大鼠；5 pg/mL 以上只能测 CFA 或 OVA 激发模型。

3. Hook 上限：1000 pg/mL 是红线

CIA 模型 21 d 关节灌洗液 IL-17A 可达 600–800 pg/mL。

关键数：Upper Hook ≥1000 pg/mL，抗体亲和足够，不会高剂量假低；仅写 500 pg/mL 的盒子，关节炎样本必须预稀释 1:2，否则读数比真值低 35 %。

4. 亚型交叉：IL-17F、IL-17AF 杂合率

IL-17A 与 IL-17F 同源 55 %，抗体稍不纯就交叉。

底线数据：COA 交叉反应 IL-17F ≤0.2 %、IL-17AF ≤0.1 %；出现 1 % 交叉时，50 pg/mL IL-17A 若伴 500 pg/mL IL-17F，结果虚高 5 pg/mL，误差 10 %。

5. 稀释线性 & MRD

大鼠血浆含 α2-macroglobulin，能与 IL-17A 形成 1:1 复合物，导致检测值偏低。

快速验证：同一血清 1:2、1:5、1:10 稀释，测得值×稀释倍数偏差 <10 % 的最小稀释比即为 MRD。≤1:5 说明稀释液已含 0.5 M NaCl + 0.05 % Tween-20，可解离复合物；MRD 1:10 以上浪费样本，增加误差。

6. 加速稳定性：37 °C 7 天偏差 <7 %

IL-17A 含 4 个 Cys，氧化后形成错配二聚体，ED50 漂移。

核对：COA "Accelerated stability" 37 °C 7 天，标准曲线中点偏差 <7 %；无此项数据的批次，–80 °C 分装 3 个月后灵敏度下降 20 %。

7. 批间差：ED50 CV ≤8 %

同一母体 200 pg/mL 中间点，10 批次 ED50 1.05–1.14 ng/mL，CV 7.2 %。

红线：COA 第三页 Inter-batch CV >10 % 的批次，多孔复测会放大到 15 %，直接换货。

8. 读数窗口与单孔成本

96T 盒子标价 2700 元，拆 80 可测孔，单孔 34 元；competitor 2×96T 标价 4600 元，单孔 29 元。

隐藏成本：不含 20×洗液，自配 PBS-T 成本 160 元；读数窗口 0–2 AU，线性最佳 0.3–1.6 AU；超出 1.8 AU 需 1:4 复测，增加 25 % 孔数。

9. 技术参数速查表（贴实验台）

八项全打钩再下单，关节炎、EAE、哮喘三种模型样本可一次测准。