1. 抗体对表位距离决定真阳性

IL-1β 成熟段 117–269 aa，前体段 1–116 在血清里半衰期 6 h。

• 捕获抗体若落在 202–215 构象环，检测抗体落在 250–263，可完全避开前体交叉。
• 说明书未标注“识别成熟段”直接索要 epitope mapping，无报告默认含前体信号，炎症样本假高 30 %。

2. 灵敏度写 0.5 pg/mL 不算数，看功能灵敏度

厂家常把零标准+2SD 当“检测限”，注册检要的是 60 例基质里 95 % 检出限。

• 要求提供 3 批试剂盒、3 天、3 台仪器的功能灵敏度报告，数值 ≤1.2 pg/mL 才够写进注册资料。

3. 交叉反应必须给到 100 ng/mL

IL-1β 与 IL-1α、IL-18 同属 IL-1 超家族，β-折叠核心区 28 % 同源。

• 参数表需写明“IL-1α 100 ng/mL 交叉 <0.02 %”，缺浓度上限视为无效声明，审评直接发补。

4. 标准品溯源链写进 COA

WHO 国际标准 86/680 活性 100 000 IU/ampoule，继任品 21/368 活性 7 500 IU/ampoule。

• 试剂盒把每 1 ng 换算成 IU，并给出相对于 21/368 的相对活性 0.95–1.05，临床实验室可直接 IU 上报。

5. 样本体积 50 μL 还是 100 μL 影响预算

高敏 Kit 把用量压到 25 μL，看似省样，稀释倍数低，基质效应放大 1.8 倍。

• 要求厂家提供“25–100 μL 血清量-回收率曲线”，回收率 90–110 % 区间越宽，越适合小鼠尾血等微量样本。

6. 板间差用“斜率比”替代 CV

四参数拟合斜率 a 值批间差异 <4 %，比末端 CV 更能反映真实漂移。

• 让销售把 10 批 COA 的斜率 a 做成折线图附在说明书附录，审评员一眼可判稳定，省去 40 例血清桥接实验。

7. 运输温控：干冰还是冰袋？

IL-1β 抗体对温度震荡敏感，反复冻融一次活性下降 10 %。

• 选购时问清“运输是否全程 -20 °C 干冰”，并要求箱内温度记录仪数据；冰袋运输即使 48 h 保持 0–4 °C，标准品也出现 5 % 漂移。

8. 售后支持：数据诊断模板

靠谱厂家会附带 Excel 模板，自动计算回收率、平行性、Hook effect。

• 发邮件 24 h 内收到修正后的四参数曲线和可疑样本标记，比便宜 300 元更有价值。

9. 价格陷阱：预稀释标准品

预稀释 7 瓶套装开封后 24 h 失效，年用量 20 块板浪费 30 % 成本。

• 选“冻干标准品 + 自备缓冲液”，自己分装 50 μL/管，-80 °C 存 6 个月，平均到每块板成本降 35 %。

10. 文献背书法：IF>5 的 paper 才是硬广

让销售提供近三年内使用同款 Kit 发表的 SCI 原文，IF>5 的至少 3 篇，文中材料部分必须写明货号与批次。

• PubMed 检索“Human IL-1β ELISA Kit + 货号”返回 0 篇，直接换供应商。