公司动态
 
首页 > 公司动态  >  技术参数:永生化乳腺叶状肿瘤...

技术参数:永生化乳腺叶状肿瘤细胞-SV40 的硬核性能表

2025-09-01

细胞身份档案

来源于 38 岁女性乳腺叶状肿瘤,病理分级低度恶性。SV40 大 T 抗原通过慢病毒整合至 chr3:178,540,211,单拷贝,无旁侧基因破坏。STR 20 位点与原始肿瘤 100 % 匹配,无 HeLa、MDA-MB-231 交叉污染记录。

生长动力学

  • 倍增时间:23.7 ± 1.1 h
  • 饱和密度:1.8 × 10^5 cells/cm2
  • 平板克隆形成率:67 %
  • 软琼脂克隆:0 个(> 50 μm),成瘤潜能未检

分子表型

标记物 表达水平 检测方法
Vimentin 98 % 阳性 ICC
CD34 92 % 阳性 Flow
p53 负表达 WB
Ki-67 28 % 阳性 IHC
PR 阴性 qPCR

基因组稳定性

  • 核型:46,XX,未见克隆性异常
  • 端粒长度:9.2 kb(TRF 法)
  • CNV 率:0.03 / Mb(WGS)

功能验证

  • 胶原收缩实验:24 h 收缩面积 38 %
  • 迁移:划痕 24 h 愈合率 41 %
  • 侵袭:Transwell Matrigel 8 h 穿透 320 ± 30 细胞
  • 药物 IC??:多柔比星 0.21 μM,帕博西尼 2.4 μM

培养条件

  • 基础培养基:DMEM-high glucose + 10 % FBS
  • 添加物:1 % NEAA、2 mM L-Gln、1 % P/S
  • 培养环境:37 °C、5 % CO?、95 % 湿度

冻存与复苏

  • 冻存液:90 % FBS + 10 % DMSO
  • 程序降温:-1 °C/min 至 -80 °C,液氮长期
  • 复苏存活率:94 ± 2 %
  • 24 h 贴壁率:96 %

质控放行标准

每批次必检:支原体 qPCR 阴性、STR 一致性 100 %、无菌 14 d 无浑浊、内毒素 < 0.1 EU/mL。