技术参数:永生化乳腺叶状肿瘤细胞-SV40 的硬核性能表
2025-09-01
细胞身份档案
来源于 38 岁女性乳腺叶状肿瘤,病理分级低度恶性。SV40 大 T 抗原通过慢病毒整合至 chr3:178,540,211,单拷贝,无旁侧基因破坏。STR 20 位点与原始肿瘤 100 % 匹配,无 HeLa、MDA-MB-231 交叉污染记录。
生长动力学
-
倍增时间:23.7 ± 1.1 h
-
饱和密度:1.8 × 10^5 cells/cm2
-
平板克隆形成率:67 %
-
软琼脂克隆:0 个(> 50 μm),成瘤潜能未检
分子表型
标记物
|
表达水平
|
检测方法
|
Vimentin
|
98 % 阳性
|
ICC
|
CD34
|
92 % 阳性
|
Flow
|
p53
|
负表达
|
WB
|
Ki-67
|
28 % 阳性
|
IHC
|
PR
|
阴性
|
qPCR
|
基因组稳定性
-
核型:46,XX,未见克隆性异常
-
端粒长度:9.2 kb(TRF 法)
-
CNV 率:0.03 / Mb(WGS)
功能验证
-
胶原收缩实验:24 h 收缩面积 38 %
-
迁移:划痕 24 h 愈合率 41 %
-
侵袭:Transwell Matrigel 8 h 穿透 320 ± 30 细胞
-
药物 IC??:多柔比星 0.21 μM,帕博西尼 2.4 μM
培养条件
-
基础培养基:DMEM-high glucose + 10 % FBS
-
添加物:1 % NEAA、2 mM L-Gln、1 % P/S
-
培养环境:37 °C、5 % CO?、95 % 湿度
冻存与复苏
-
冻存液:90 % FBS + 10 % DMSO
-
程序降温:-1 °C/min 至 -80 °C,液氮长期
-
复苏存活率:94 ± 2 %
-
24 h 贴壁率:96 %
质控放行标准
每批次必检:支原体 qPCR 阴性、STR 一致性 100 %、无菌 14 d 无浑浊、内毒素 < 0.1 EU/mL。