细胞身份验证的强制阈值

STR 图谱必须覆盖小鼠 18 个核心位点，其中 14 个位点匹配率 ≥ 92 % 才签发批次合格证。任何等位基因漂移 > 8 % 即视为交叉污染，整批销毁并公开召回。原代来源组织需提供解剖影像与 RNAscope 切片，确认取材自颈动脉分叉近心端 2 mm 区段。

无菌与安全二级屏障

支原体 qPCR 检测 Ct ≥ 36，且需同步进行 14 天肉汤培养阴性验证。细菌、真菌培养皿在 28 °C 与 37 °C 双温孵育，无可见菌落为放行硬指标。外源病毒采用小鼠病原体 Panel PCR，包含 LDEV、MVM、MHV 等 11 项，任一项阳性即判定生物安全不合格。

hTERT 表达水平的量化红线

qPCR 以 Gapdh 为内参，hTERT mRNA 相对表达量 ≥ 1.5 视为有效永生化。低于此值，细胞在 30 代前出现 β-gal 阳性率 > 15 %，直接淘汰。Western blot 需检出 127 kDa 主带，灰度值与 β-actin 比值 ≥ 0.8，确保蛋白水平同步。

功能表型保留指标

• 乙酰化 LDL 摄取率 ≥ 95 %，DiI-Ac-LDL 荧光信号集中在核周。
• eNOS 活性 钙离子诱导 NO 释放 ≥ 3 μM，检测探针 DAF-FM DA 荧光增幅 > 4 倍。
• 剪切应力响应 15 dyn/cm2 刺激 6 h 后，Klf2 mRNA 上调 ≥ 20 倍，验证动脉内皮特异性。

基因组稳定性阈值

核型分析执行 G-banding，40,XY 模式保持率 ≥ 98 %。结构变异检测采用低深度全基因组测序，CNV 负荷 < 5 Mb，且不得涉及血管功能相关基因座（Kdr、Vwf、Nos3）。每 10 代复核一次，报告公开下载。

培养体系标准化配方

基础培养基：DMEM-low glucose + 20 % FBS（批次经 NO 释放验证）+ 1×ECGS + 1 % P/S。FBS 需通过内皮管腔形成测试：Matrigel 上 6 h 节点数 ≥ 15 个/视野。培养器皿统一使用鼠尾胶原Ⅰ预包被，浓度 50 μg/mL，4 °C 过夜，确保表面均匀。

放行文件与可追溯性

每批次随附电子档案：

• 原代分离视频（解剖至首次贴壁）。
• STR、核型、qPCR、Western blot 原始图。
• 功能验证完整曲线（NO 释放、DiI 摄取、剪切响应）。

档案编号与冻存管二维码一致，扫码即可溯源全部原始数据。