Caspase-1 试剂盒主要用于检测 Caspase-1 酶活性或蛋白表达水平。活性检测依赖于底物水解产生的信号,而表达检测则通过抗体结合实现。前者适用于动态酶活研究,后者适用于蛋白定量分析。样本类型包括细胞裂解液、组织匀浆或血清,不同样本需匹配相应试剂盒的裂解效率和干扰物耐受性。例如,组织样本富含内源性蛋白酶,需选择含有高效抑制剂体系的试剂盒。
灵敏度决定了可检测的最低目标分子浓度,通常以 pmol/min 或 ng/mL 表示。高灵敏度试剂盒适用于低丰度样本,如原代细胞或微量血清。检测范围需覆盖预期浓度区间,避免样本稀释或浓缩引入误差。部分试剂盒提供线性范围验证数据,优先选择覆盖 0.5-50 U/mL 活性区间的产品。
Caspase 家族成员(如 Caspase-4/5)具有结构相似性,易产生交叉反应。优质试剂盒会提供特异性验证数据,例如使用重组蛋白或基因敲除样本证明仅针对 Caspase-1 响应。避免选择未注明交叉反应测试的产品。
试剂盒分为荧光法、比色法和化学发光法。荧光法需配备酶标仪,但灵敏度较高;比色法适用于常规实验室,操作简便。全程操作时间从 2 小时至过夜不等,需根据实验计划选择。集成化试剂盒(含预混液)可减少操作步骤,降低人为误差。
低温运输的试剂盒需验证干冰包装完整性。检查核心组分(如底物、抗体)的保质期和复溶后稳定性,避免多次冻融导致效价下降。优先选择可长期存储于 -20℃ 的单次用量分装产品。
选择已被同行研究广泛引用的试剂盒品牌,其可靠性经过实践验证。供应商应提供详细Protocol、故障排查指南和技术支持渠道。避免选择无公开验证数据或用户反馈的产品。
除初始采购成本外,需计算单次检测费用和设备适配成本。高通量研究可选择大包装规格以降低单价,小规模实验则适用小型试剂盒。