Universal WB Toolkit 把蛋白提取、浓度测定、电泳、转膜、抗体孵育、ECL 显影 6 大模块预装成一条“流水线”。裂解液自带蛋白酶+磷酸酶双抑制剂，组织样品冰上 10 min 就能拿到 4 mg mL?1 总蛋白；预制胶 12+2 孔，兼容 1 μL 上样，15 min 跑完 70 V 浓缩段；半干转 7 min 就能把 250 kDa 蛋白搬到 NC 膜。整套流程从剪组织到压片 90 min 收工，比传统拆买试剂快 2.5 倍，这才是“爆款”二字在实验室里的硬指标。

电泳胶浓度：8 %、10 %、12 % 预混液一次给齐

KTD106-CN 把三种分离胶预混液做成 50 mL 即用型，8 % 胶跑 250 kDa 蛋白带型笔直，12 % 胶让 15 kDa 小肽不跑出前沿。瓶身贴二维码，扫码自动弹出梯度选择表，输入目标蛋白分子量直接给出推荐浓度，新手也不会灌错胶。预制胶灌封 12 个月不缩水，4 °C 存放不会出现“U”型凹陷，省掉二次灌胶的焦虑。

转膜 7 min 背后的电流算法：0.8 mA cm?2 是高压极限

半干转槽面积 15 × 10 cm，KTD106 设定恒流 120 mA，场强 0.8 mA cm?2，7 min 就能把 50 kDa 蛋白转完。电流再高，NC 膜局部温度 45 °C 以上，孔径收缩，抗体进不去；低于 0.5 mA cm?2，大分子转不透，PVDF 膜背面染不到丽春红。工具箱里配一张“电流-时间-分子量”三维卡，对着找交叉点，转膜失败率直接归零。

封闭 5 % 脱脂奶粉为何被替换成 1 % 酪蛋白

传统 5 % 脱脂奶粉里残留牛 IgG，抗牛二抗会交叉反应，背景灰度 18 起步。KTD106-EN 改用酸水解酪蛋白，分子量 1–3 kDa，封闭后膜面电荷被中和，抗小鼠/抗兔二抗非特异结合降到 3 个灰度单位。封闭时间从 1 h 缩到 15 min，室温摇床 50 rpm 即可，省掉 4 °C 过夜冰箱位。

ECL 底物 A:B 比例 1:1 拉到 1:4 信号能多撑 30 s

KTD106 的 ECL 采用高碘酸盐增强，鲁米诺浓度 2 mM，A:B 体积比 1:1 时 250 ng 条带 5 s 过曝。把 B 液稀释 4 倍，信号半衰期从 30 s 延长到 60 s，CCD 拍照不用抢时间， grayscale 线性区间 8 bit 拉到 14 bit，定量误差从 15 % 缩到 5 %。底物瓶身刻 5 条刻度，直接目测 1:4 体积，不用额外量筒。

抗体回收：0.05 % NaN? 让一抗再孵 3 次

一抗稀释液里加 0.05 % NaN?，4 °C 避光存放 14 天，活性维持 90 %。KTD106 配 30 mL 抗体回收瓶，瓶口 0.22 μm 透气盖，防止霉菌污染。GAPDH 抗体循环 3 次，信号强度衰减 < 10 %，单张膜摊销成本降到 1/3，做 96 孔板筛查也能扛住预算。

高背景急救：TBST 里加 0.25 M NaCl 30 s 洗掉灰雾

封闭不足或一抗过量，膜面出现灰雾，传统做法把膜泡 TBST 10 min 不见效。KTD106 急救卡写：0.25 M NaCl + 0.1 % Tween-20，室温摇 30 s，灰度值从 20 降到 5，目标条带不受影响。高盐瞬时洗脱非特异蛋白，救回一张膜只需 1 min，不用重新跑胶。

试剂寿命：ECL 开封 6 个月信号腰斩

鲁米诺氧化后 4 °C 半衰期 180 天，第 6 个月 250 ng 条带灰度掉 50 %。KTD106 把 A 液分装 5 mL 棕色安瓿，一次性折断使用，剩余部分零氧气回灌，开封 24 h 内用完，信号强度保持出厂水平。安瓿瓶身写“24 h 报废”红字，现场不会有人舍不得扔。

现场验收：250 ng BSA 标准带 5 min 过曝即合格

新到一盒 KTD106-CN，取 250 ng BSA 标准，8 % 胶 15 min 跑完，7 min 转膜，封闭 15 min，抗兔 IgG 1:5000 孵 30 min，ECL 1:4 曝光 30 s，灰度值 14 bit 满量程 80 % 即签字收货。5 min 完成验收，比测 pH、测浓度省事，现场就能判定退货还是留用。