重组Protein A/G融合蛋白通过硫醚键偶联至6%交联琼脂糖,密度10 mg/mL凝胶,换算约6.5 nmol/mL。对人IgG结合容量25 mg/mL,对小鼠IgG2a 18 mg/mL,一瓶树脂即可覆盖从鼠到人抗体的捕获需求。
45–165 μm粒径分布,HETP=0.07 cm,柱床高5 cm时理论塔板数>3500。150 cm/h线性流速下背压0.22 MPa,可放入10 mL注射器手动操作,也能上?KTA Start做自动化。
稳定区间pH 2–12;0.2 M柠檬酸洗脱30循环,载量损失<3%。耐受2 M NaCl、20 mM DTT、8 M尿素,0.1% SDS会使配基脱落率>15%,清洗与保存阶段禁用。
在0.5 mL BMR2070柱中,以hIgG 1 mg/mL上样:
追求高通量选150 cm/h,回收率与速度折中最佳,偏差控制在5%以内。
4 ℃结合速率k?下降20%,延长保留时间到3 min即可补回;25 ℃载量峰值提前,适合快速批次。60 ℃处理1 h活性剩90℃,可承受热灭菌,长期仍建议≤40 ℃。
标准流程:0.1 M柠檬酸pH 3.0洗脱→中性PBS→0.1 M NaOH 5 min去除内毒素→20%乙醇保存。循环100次载量剩85%,200次剩70%;柠檬酸钠若换成0.2 M甘氨酸pH 2.5,寿命缩短至80次,但洗脱峰体积缩小30%。
每批BMR2070随货提供:
任一指标超±5%即判不合格,可无条件退换。