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BMR2070 Protein A/G 树脂:技术参数硬核速览

2025-11-04

1. 配基密度:双亲和配基的摩尔浓度

重组Protein A/G融合蛋白通过硫醚键偶联至6%交联琼脂糖,密度10 mg/mL凝胶,换算约6.5 nmol/mL。对人IgG结合容量25 mg/mL,对小鼠IgG2a 18 mg/mL,一瓶树脂即可覆盖从鼠到人抗体的捕获需求。

2. 颗粒骨架:粒径与流速的权衡

45–165 μm粒径分布,HETP=0.07 cm,柱床高5 cm时理论塔板数>3500。150 cm/h线性流速下背压0.22 MPa,可放入10 mL注射器手动操作,也能上?KTA Start做自动化。

3. 化学边界:pH、盐、还原剂的许可范围

稳定区间pH 2–12;0.2 M柠檬酸洗脱30循环,载量损失<3%。耐受2 M NaCl、20 mM DTT、8 M尿素,0.1% SDS会使配基脱落率>15%,清洗与保存阶段禁用。

4. 动态载量:流速-结合曲线实测

在0.5 mL BMR2070柱中,以hIgG 1 mg/mL上样:

  • 60 cm/h 时穿透10%载量26 mg/mL
  • 150 cm/h 时23 mg/mL
  • 300 cm/h 时19 mg/mL

追求高通量选150 cm/h,回收率与速度折中最佳,偏差控制在5%以内。

5. 温度系数:4 ℃与25 ℃对比

4 ℃结合速率k?下降20%,延长保留时间到3 min即可补回;25 ℃载量峰值提前,适合快速批次。60 ℃处理1 h活性剩90℃,可承受热灭菌,长期仍建议≤40 ℃。

6. 循环寿命:酸-碱交替清洗衰减模型

标准流程:0.1 M柠檬酸pH 3.0洗脱→中性PBS→0.1 M NaOH 5 min去除内毒素→20%乙醇保存。循环100次载量剩85%,200次剩70%;柠檬酸钠若换成0.2 M甘氨酸pH 2.5,寿命缩短至80次,但洗脱峰体积缩小30%。

7. 质检指标:批次间硬红线

每批BMR2070随货提供:

  • hIgG动态载量(≥25 mg/mL)
  • 颗粒完整率(激光粒度≥95%)
  • 配基脱落(ELISA≤0.2%)

任一指标超±5%即判不合格,可无条件退换。