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把“大鼠”做成封闭王牌:Norm...
把“大鼠”做成封闭王牌:Normal Rat Serum 的底层逻辑
2025-11-03
大鼠血清蛋白谱与小鼠、人源抗体交叉位点少,Fc 段同源性仅 62 %。BMS0100 采集 8 周龄 SPF 级大鼠心脏血,低温离心去纤维蛋白,56 ℃ 30 min 补体灭活,0.1 μm 三级过滤后 IgG 浓度锁定 9.2 mg/mL,比兔血清低 20 %,非特异占位能力反而更高,直接把膜空白区占满,一抗二抗的无差别吸附失去落脚点。
BMS0100 技术参数拆给你看
内毒素 :< 0.5 EU/mL,腹腔注射级标准,原代巨噬细胞封闭 2 h 不诱导 TNF-α 上升。
血红蛋白 :≤ 0.3 mg/dL,520 nm 吸光度 0.015,荧光 WB 的 Cy5 通道背景接近基线。
pH 7.2–7.4,渗透压 300 mOsm/kg ,与 D-PBS 完美等渗,细胞封闭后形态不变圆。
生物负载 :0 CFU/10 mL,开瓶后 4 ℃ 60 天增菌培养阴性,写进实验室主文件不用每周过滤。
封闭实测:大鼠血清 vs 传统 BSA
PVDF 膜 4 ℃ 封闭过夜,一抗小鼠抗人 β-actin,二抗羊抗鼠 800CW:
封闭剂
800 CW 背景灰度
信噪比
5 % BSA
950
8
5 % BMS0100
120
65
背景直接砍掉 87 %,Odyssey 远红通道 700 kDa 蛋白marker 附近无拖尾,单细胞定量重复 CV<3 %。
把参数写进方法,一次通过审稿
“Membranes were blocked with 5 % Normal Rat Serum (BMS0100, Lot# R202506, IgG 9.2 mg/mL, endotoxin < 0.5 EU/mL) in TBST for 16 h at 4 °C.” 一行把来源、纯度、内毒素、封闭时长全部锁死,编辑找不到返修借口。
一瓶三用,把成本压到最低
WB 封闭 :1:20 稀释,100 mL 工作液封 20 张迷你膜,单张成本 2.5 元。
流式封闭 :原液 100 μL/10^6 细胞,4 ℃ 15 min,大鼠、小鼠、人源抗体混搭无交叉。
抗体稀释 :2 % BMS0100 + 0.02 % NaN?,一抗 4 ℃ 回收 7 次,效价下降 < 5 %。