驴血清与山羊、小鼠、兔血清蛋白序列同源性低,Fc 段识别位点差异大。BMS0140 用健康成年驴全血离心去纤维蛋白,0.1 μm 过滤后再做 56 ℃ 30 min 补体灭活,IgG 含量实测 7.8 mg/mL,比小牛血清低 40 %,非特异结合更少。封闭时这些异源蛋白先占据 PVDF 膜疏水位点,一抗二抗的非特异吸附被“挤”出去,背景直接降到胶片基线。
同样一张多通道荧光膜,封闭 1 h:
| 封闭剂 | 488 nm 背景灰度 | 555 nm 背景灰度 | 640 nm 背景灰度 |
|---|---|---|---|
| 5 % BSA | 180 | 210 | 165 |
| 5 % BMS0140 | 45 | 52 | 38 |
| 灰度值直接反映非特异结合,驴血清在远红通道把背景压到 40 以下,单分子曝光 2 min 无雪花噪点。 |
“Membranes were blocked with 5 % Normal Donkey Serum (BMS0140, Lot# D221245, IgG 7.8 mg/mL, endotoxin < 1 EU/mL) in TBST for 60 min at RT.” 一行参数把来源、纯度、内毒素全部锁死,方法学部分一次通过。