公司动态
 
首页 > 公司动态  >  把背景压到基线:Normal Donke...

把背景压到基线:Normal Donkey Serum 的封闭逻辑

2025-11-03

驴血清与山羊、小鼠、兔血清蛋白序列同源性低,Fc 段识别位点差异大。BMS0140 用健康成年驴全血离心去纤维蛋白,0.1 μm 过滤后再做 56 ℃ 30 min 补体灭活,IgG 含量实测 7.8 mg/mL,比小牛血清低 40 %,非特异结合更少。封闭时这些异源蛋白先占据 PVDF 膜疏水位点,一抗二抗的非特异吸附被“挤”出去,背景直接降到胶片基线。


BMS0140 的技术参数藏在质检单

  • 内毒素:< 1 EU/mL,细胞免疫荧光实验里不会激活 NF-κB 信号,避免假阳性核染。
  • 血红蛋白:< 0.5 mg/dL,520 nm 吸光度 0.02,荧光通道没有自发荧光干扰。
  • pH 7.0–7.4,渗透压 295 mOsm/kg,与 PBS 一致,稀释抗体时不会引起细胞皱缩。
  • 生物负载:0 CFU/10 mL,开瓶后 4 ℃ 30 天仍能通过增菌培养检测,写进 SOP 不用每周重新过滤。

封闭效果实测:驴血清 vs 传统 BSA

同样一张多通道荧光膜,封闭 1 h:

封闭剂 488 nm 背景灰度 555 nm 背景灰度 640 nm 背景灰度
5 % BSA 180 210 165
5 % BMS0140 45 52 38
灰度值直接反映非特异结合,驴血清在远红通道把背景压到 40 以下,单分子曝光 2 min 无雪花噪点。

把血清写进方法学,审稿人不再追问

“Membranes were blocked with 5 % Normal Donkey Serum (BMS0140, Lot# D221245, IgG 7.8 mg/mL, endotoxin < 1 EU/mL) in TBST for 60 min at RT.” 一行参数把来源、纯度、内毒素全部锁死,方法学部分一次通过。


实验室省钱技巧:一瓶血清三种用法

  • WB 封闭:1:20 稀释,100 mL 工作液可封 15 张迷你膜,单张成本 3 元。
  • 免疫荧光封闭:直接滴加原液,37 ℃ 30 min,细胞不会卷边,核染定位清晰。
  • 抗体稀释液:2 % 驴血清 + 0.02 % NaN?,一抗 4 ℃ 回收 5 次,效价下降 < 10 %。