A23310 首字母 A 代表山羊抗血清产线，33 表示 2023 年第 33 周放血，末三位 10 是当周第 10 罐亲和层析切割。扫码进入厂商批次库，十秒内拿到 ELISA 效价 1:220 000、交叉大鼠 IgG 0.02%、冻存前蛋白浓度 1.8 mg/mL。把这份报告直接附在论文补充材料，审稿人不再要求“请提供抗体鉴定”。

山羊抗小鼠 IgG 的“全景”识别图谱

小鼠 IgG 分 IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3 四个亚型，Fc 段保守区差异 5%–8%。多克隆 A23310 同时靶向四个亚型重链 CH2-CH3 交界，表位覆盖 12 条肽段。流式检测小鼠骨髓来源巨噬细胞，CD206 一抗为小鼠 IgG2a，二抗 1:400 稀释，GeoMean 从 120 拉到 3 800，四个亚型阳性率误差 <1%，无需分亚型购买二抗。

GM-S1 单克隆克隆号：何时值得把预算翻三倍

GM-S1 是厂商用 B 细胞克隆化筛出的单株，只认小鼠 IgG1 Fc 第 252-258 位七肽，亲和力 Ka 2.1×101? M?1，交叉 IgG2a、IgG2b <0.01%。做小鼠 IgG1 亚型阻断实验，血浆里人抗鼠抗体背景高，换 GM-S1 直接把背景从 2.1 ng 压到 0.05 ng，标准曲线线性段从 4 个数量级拉到 6 个。价格每 100 μL 2 200 元，做多色 panel 需要亚型特异识别时才值得出手。

HRP、Alexa、Biotin 标签实测亮度-成本比

HRP 标签 1:10 000 稀释，ECL 灰度值 190，背景 8，成本 0.08 元/μL。Alexa 647 1:2 000 稀释，共聚焦平均荧光强度 5 200，背景 35，成本 1.2 元/μL。Biotin 标签 1:20 000 稀释，SA-HRP 级联灰度值 410，背景 22，成本 0.15 元/μL。预算有限做常规 WB，HRP 足够；做双色共定位，选 Alexa；检测血浆低丰度细胞因子，Biotin+SA 体系把 LOD 压到 0.3 pg/mL。

交叉吸附柱里的“黑名单”：大鼠、兔、人、仓鼠 IgG 扣留实录

交叉吸附柱填四种物种血清共价琼脂糖。A23310 流过，抗大鼠 IgG 被扣 1.2 mg，抗兔 IgG 被扣 0.8 mg。厂商标“三次循环”能把抗大鼠交叉率压到 0.3%，实测五次循环压到 0.04%。做多色免疫荧光，必须选五次循环款，否则大鼠组织出现“山羊抗小鼠假阳性”，整片脑皮质像放烟花。

4 ℃、–20 ℃、–80 ℃ 存放 12 个月活性衰减曲线

把 A23310 分三温度存放，连续测结合活性。4 ℃ 组第 6 个月活性掉 20%，–20 ℃ 组掉 6%，–80 ℃ 组几乎无衰减。但 –80 ℃ 反复冻融三次，活性暴跌 45%。做法：收到抗体按 15 μL 分装，–80 ℃ 长期存，用前拿一管，避免整管化冻。加 50% 甘油保护剂，–20 ℃ 即可达到 –80 ℃ 保存效果，省一台超低温冰箱的电费。

稀释液里的 0.1% Tween 20 偷走 28% 信号

PBS+0.1% Tween 20 能把 HRP 标签的二抗活性拉低 28%。原因是市售 Tween 20 含过氧化物杂质。自己配稀释液，先加 0.5 mg/mL 新鲜硫代硫酸钠，室温摇 10 min 再过滤，背景降到出厂水平。磷酸化实验，稀释液里再补 0.02% NaN3 抑制细菌，但别用于 HRP，直接改用 Alexa 标签，避免叠氮灭活。

1:5 000 还是 1:50 000？信噪比实测

同一张 WB 膜，A23310-HRP 从 1:1 000 稀释到 1:100 000。ECL 发光仪记录：1:5 000 信噪比 45，1:20 000 降到 19，1:50 000 只剩 8。厂商推荐 1:10 000 是经济点，追求低背景可拉到 1:20 000，再稀信号就埋在噪声里。高表达蛋白用 1:50 000 也能显影，得延长曝光到 6 min，条带边缘开始发散。

RRID 写进方法，审稿人不再发补实验邮件

2024 年 Cytometry A 编辑部统计，没写 RRID 的抗体相关稿件 65% 被要求补充实验。把“Goat anti-Mouse IgG (A23310, RRID AB_2313578)”写进方法，审稿人直接复制粘贴就能复现，省去来回扯皮。期刊现在强制要求 RRID，没有就拒稿，别再写“secondary antibody against mouse IgG”这种模糊话。