实验室用得到,别再被广告词牵着走
细胞实验里 2% 杂质足以让背景信号翻倍。HPLC 报告必须给出主峰面积百分比,附带 SEC-MALS 数据才能证明没有聚集体。缺少 MALS 的 COA 直接跳过,省得下游做迁移实验时多出一条非特异条带。
原代巨噬细胞对 LPS 敏感度 0.05 EU/mL,假设工作浓度 100 ng/mL,蛋白溶液里内毒素 0.1 EU/mg 就会把细胞推向炎症状态。索要批次 LAL 实测值,报告写“<0.1 EU/mg”却未给出具体数字的,一律按 0.09 EU/mg 计算,再评估体积用量能否压到安全线以下。
E.coli 表达产物无糖基化,售价低 30%,适合无血清培养体系,不会引入未知糖链变量。CHO 版本带 O-糖基化,半衰期延长 1.8 倍,体内实验更友好。做动物模型就选 CHO,纯细胞学实验用 E.coli 足够,别让糖基化差异成为数据噪点。
部分厂商默认加 0.1% BSA 做稳定剂,ELISA 用户觉得省事,做表面等离子共振(SPR)的人得哭:BSA 会竞争包被位点,信号漂移 20%。下单前勾选“no carrier”或“Trehalose only”版本,价格通常不变,却能直接跳过透析除 BSA 的 4 h 前处理。
PDGF-AA 工作浓度常见 20 ng/mL,6 孔板每孔 2 mL,一次实验消耗 40 ng。
实验室月用量>200 μg 直接选 1 mg,避免批次差异导致曲线漂移。
COA 里常写“ED50=10–50 ng/mL”,区间跨度 5 倍,等于没给信息。让供应商附 NR6R-3T3 细胞增殖报告,曲线必须给出 95% 置信区间,EC50 标准差<15% 才算合格。自己再随机抽一管做平行实验,偏差>20% 直接退货,防止活性虚标。
蛋白在 4 ℃ 稳定 7 天,厂商用蓝冰运输就能省 200 元运费。实验排期紧、周末无人收货,选干冰防止滞留升温。提前查快递路由,中转站>2 次优先干冰,别让 37 ℃ 仓库把活性烤掉一半。
投稿时审稿人常要求“结果可重复”。下单一次性买两批,每批单独跑标准曲线,R2 差值<0.02 才能混用。发现斜率差异>10%,用批次号做区组设计,数据表里注明,返修意见直接少一页。
进口品牌额外做 3 项验证:糖基化谱、EC50 批次一致性、90 天加速降解实验。国产若只能提供 HPLC 纯度,价差就是验证成本。发 SCI 论文选进口,教学实验用国产,别让审稿人用“蛋白质量质疑”拖你两个月。