70 个氨基酸的 β 趋化因子，标签、载体、比活性任一条踩坑，THP-1 细胞就拒绝下坡。

1. 比活性底线：150 IU·μg?1 以下直接退货

• WHO 标准品 92/520 定义 1000 IU ≈ 0.8 ng，换算后 150 IU·μg?1 对应 ED50=10 ng/ml。
• 市场常见写 ED50=50 ng/ml，看似“高纯”，其实只有 30 IU·μg?1，做 Transwell 要把浓度拉到 500 ng/ml，成本翻 10 倍。
• 让厂商出具 IU 换算页，当场把 ED50 换成 IU，低于 150 的批次直接筛掉，预算立省一半。

2. 标签位置：N 端 His? 让活性掉 60 %

• CCL20 前 12 个氨基酸构成 CCR6 结合沟，N 端 His? 会把 α1 区推高 1.2 ?，KD 从 2 nM 变 20 nM。
• 选 C 端标签 或 SUMO-His 融合后酶切 版本，比活性可维持 200 IU·μg?1，价格只贵 10 %，活体实验更放心。

3. 缓冲液配方：海藻糖浓度 10 % 是红线

• 5 % 海藻糖 ?20 °C 保存 3 个月聚体率 18 %；10 % 海藻糖 ?80 °C 一年聚体 < 2 %。
• 聚体在 Native-PAGE 呈 21 kDa 拖尾，CCR6 结合率掉 40 %，Transwell 迁移 CV 飙到 25 %。
• 出厂配方必须写 PBS+150 mM NaCl+10 % 海藻糖，缺一条就换供应商。

4. 内毒素可视图：0.05 EU/μg 是活体天花板

• 0.1 EU/μg 的 CCL20 尾静脉注射 200 ng 就能让小鼠血清 IL-6 升到 150 pg/ml，掩盖本身趋化信号。
• 要求 COA 附 动态 LAL 曲线，不是单点数值；斜率 > 0.03 OD·min?1 提示微量热源，批次拒收。

5. 冻干 vs 液体：冻干活性 +20 %，运费 ?30 %

• 液体 ?80 °C 保存 12 个月活性掉 20 %，干冰运输每公斤 ￥200；冻干品 25 °C 避光 24 个月零损失，常温运输。
• 复溶用 15 °C 水浴 90 s，立即冰浴，Transwell 迁移率与新鲜液体平行，误差 < 5 %。

6. 荧光标记度：Alexa 488 1.1 倍最稳

• 标记度 2 时 Cys31 被双标，CCR6 结合 KD 升到 35 nM，迁移率掉 50 %。
• 选标记度 1.0–1.2 且附 MALDI-TOF 图谱，多一个标记峰直接退货，活体成像信背比维持 12:1。

7. 体积策略：50 μg 小包装更抗冻融

• 100 μg 分 10 μg×10 管，第三次冻融聚体率 15 %；50 μg 分 5 μg×10 管，一次用完，聚体 < 3 %。
• 核算单盘迁移成本，小包装 CV 值低一半，发文章审稿人不再追问重复性。

8. 售后隐藏福利：免费重标定

• 主流品牌提供 一次免费活性重测，把剩余样品寄回，他们用 CCR6-CHO 报告基因复检，偏差 > 15 % 直接换新。
• 30 天内使用，附带温度记录，客服默认优先赔付，实验节奏不停。