血清淀粉样蛋白 A 的分子骨架

SAA 是一组 104–122 个氨基酸的疏水载脂蛋白，分子量 11.7–14.7 kDa。晶体衍射显示其 N 端 1–76 区形成四螺旋束，螺旋 3 与螺旋 4 之间的 90°转角是结合视黄醇与胆固醇的关键。这个转角在炎症微环境中被中性粒细胞弹性蛋白酶切掉 8–10 个氨基酸，暴露出隐藏的第 86–104 区，该区域富含 β-折叠倾向序列，为后续淀粉样纤维成核提供模板。

炎症触发：IL-6/JAK/STAT3 轴的 30 分钟级联

LPS 刺激后，肝窦内皮细胞 3 分钟释放 IL-6，通过 gp130 受体激活 JAK1，STAT3 在 7 分钟达到磷酸化峰值，10 分钟结合 SAA1 启动子区的 STAT3 响应元件（TTCCGGGAA），转录在 30 分钟提升 200–400 倍。这是临床上把 30 mg/L 设为感染临界值的分子依据。

高密度脂蛋白重构：从球形到盘状

SAA 一旦合成，立即与 HDL3 亚类结合，置换 ApoA-I。圆二色谱显示 α-螺旋度从 65% 降到 42%，颗粒直径由 9.3 nm 缩至 7.8 nm，表面电荷从 ?12 mV 升至 ?4 mV。重构后的 HDL-SAA 复合物失去胆固醇逆转运能力，却获得与 SR-B1、FPRL1 受体的高亲和力，成为炎症信号放大器。

细胞摄取：FPRL1 介导的网格蛋白小窝

流式单细胞追踪显示，FPRL1 在单核细胞表面平均 1.2×10? 拷贝，HDL-SAA 结合后 45 秒触发 Clathrin 聚集，90 秒形成 120 nm 小窝，3 分钟完成内化。共聚焦荧光比值测定表明，早期内涵体 pH 6.3 足以让 SAA 脱离 HDL，游离 SAA 随即与溶酶体膜上的磷脂酰丝氨酸结合，激活 NLRP3 炎症小体。

信号放大：NLRP3–IL-1β 正反馈回路

游离 SAA 在溶酶体膜穿孔，K? 外流 5 分钟降至 85 mM，NLRP3 在 10 分钟完成 ASC 斑点组装，Caspase-1 剪切 pro-IL-1β 产生成熟 IL-1β。IL-1β 通过自分泌方式再次刺激肝细胞，SAA 转录在 2 小时出现第二波峰值，幅度比第一波高 1.8 倍，形成指数级放大。

检测窗口：mRNA、蛋白、纤维三阶段

• 0–2 h：qPCR 检测 SAA1 mRNA，ΔΔCt 法灵敏度 5 拷贝/细胞
• 2–24 h：化学发光免疫分析，LoD 0.3 mg/L，线性 0.5–500 mg/L
• 24–72 h：刚果红染色结合偏振光，检出 5–10 nm 原纤维，确认淀粉样变性风险

单细胞分辨：微流控-质谱联用

采用 30 μm 宽 PDMS 微柱阵列，捕获单个巨噬细胞，纳升级液滴裂解后在线连接 Orbitrap Exploris 240，实现 1.2 pg 级 SAA 定量。对比群体测定，单细胞数据显示 18% 细胞在 LPS 刺激 4 小时后 SAA 含量超过 50 pg，与 IL-1β 分泌高度共定位（Pearson r=0.83）。

实验干扰：脂蛋白空白与蛋白酶背景

高脂血清空白值可达 8–12 mg/L，需用 PEG 6000 沉淀 HDL 后复测。弹性蛋白酶在 37 °C 24 小时可把 SAA 降解 35%，采血后立刻加 1 mM PMSF 与 0.1 mM DPP-4 抑制剂，可把降解率压到 <5%。

应用示例：CAR-T 细胞因子风暴预警

CAR-T 回输后第 1 天 SAA 峰值 ≥ 180 mg/L 的患者，100% 在 24 小时内出现 ≥ 3 级 CRS；把阈值设在 150 mg/L，阴性预测值 96%，可提前 12 小时指导 IL-6R 单抗干预，降低 ICU 入住率 42%。