1. 标准品溯源链

NIBSC 93/722 是目前唯一可溯源的人 IL-10 国际标样，1 000 IU = 1 μg。试剂盒 COA 里必须出现该批号，校准曲线斜率 0.97–1.03，截距 ±1.5 pg/mL。缺少这条，临床多中心换算系数漂移 10%，文章返修只能整批重测。

2. 真·功能灵敏度

缓冲液检出限 0.5 pg/mL 是理论值，血清基质把背景抬 3 倍，功能灵敏度实际 2 pg/mL。采购页索要 6 次血清低值 CV ≤15% 报告，才能覆盖健康人 1–5 pg/mL 的基线，避免“测不到”被质疑灵敏度造假。

3. 天然 vs 重组抗体对

人血清里存在糖基化 IL-10，糖位在 Asn116。识别此位点的抗体对能把回收率从 85% 拉到 98%，否则糖基化样本会被低估 10%。让厂家提供“糖基化血清回收”数据，选 ≥95% 的款，糖尿病大队列也稳。

4. 平台交叉对照

Luminex 多因子珠式法常把 IL-10 与 IL-4 珠混用，交叉荧光 3%。做单因子 ELISA 要求附 60 例血清与 Luminex 的 Passing-Bablok 回归，斜率 0.92–1.08 才接收，避免同一队列两种平台对不上，临床切点白切。

5. 预包被板保质期

预包被抗体板 4 °C 密封 12 个月，开袋 1 h 内必须用完。样本 >100 例选现配板：包被 1 μg/mL 4 °C 过夜，封闭 1% BSA+2% 蔗糖，板内 CV 4%，成本降 30%。把包被日期写在板侧边，过期板直接报废，省得数据 CV 飙到 10% 找不到原因。

6. 批间差现场验收

新批次抽 24 例随机血清，与旧批次平行检测，回归斜率 0.9–1.1，截距 ±2 pg/mL。高、中、低质控各 6 孔，CV ≤8%，偏差 ≤5%。把截屏贴冰箱门，下一批到货先比对，超标直接退货，避免整批数据报废。

7. 读数窗口与淬灭

TMB 显色 15 min 是平台期，提前 2 min 看板，高标孔浅蓝即可终止。延迟 5 min OD 掉 4%，用双波长 450/630 nm 差减能把漂移拉回 1%。把计时器声音开到最大，避免聊天错过终止点，一块板 96 孔一口气完成。

8. 环保与废液

终止液 2 M 硫酸，用碳酸氢钠中和到 pH 7 再倒。TMB 含 0.01% H?O?，无重金属，可直接下水。板子 70% 乙醇浸泡后当塑料回收，重复利用读数 CV 翻倍，建议一次性发文章，数据干净。