细胞毒性实验里，Granzyme B 是 CTL 与 NK 细胞杀伤力的直接扩音器。试剂盒选错一次，整个 CAR-T 药效项目数据被审稿人一句“检测方法不严谨”打回。把选购流程拆成六步硬指标，每一步都给出可核实的实验证据，下单前照单勾选，基本避坑。

1. 抗体对：单抗抓全长，多抗识活性位点

• 捕获抗体选克隆 GB11，识别 Granzyme B 重链 1–15 aa，避免活性形式漏检
• 检测抗体用多抗覆盖催化三联体 His57–Asp102–Ser195，信号放大 2.3 倍
• 要求厂家出具表位映射报告，缺失就直接换品牌，避免假阴性

2. 灵敏度实战：0.3 pg/mL 只是证书数字

• 零标准重复 24 孔，均值+3SD 实测 LOD 必须 ≤ 1.0 pg/mL
• 某国产盒标 0.3 pg/mL，实测 2.1 pg/mL；进口 R 品牌标 0.9 pg/mL，实测 0.8 pg/mL
• 让销售提供原始 24 孔 OD 值，缺数据就判不合格，拒绝宣传页

3. 样本兼容性：裂解液稀释倍数藏在脚注

• CAR-T 细胞上清用 1 % Triton X-100 裂解，Granzyme B 回收率 75 %
• 试剂盒说明书只写“适用于血清”，没提裂解液，等于没说
• 自己跑 3 个裂解液梯度，1:2 稀释后回收率 92 %，写进实验室 SOP，审稿人直接认可

4. 交叉反应：Granzyme A 100 ng/mL 不能出头

• Granzyme A 与 B 同源性 42 %，交叉反应 >0.1 % 就把阳性率虚抬 5 %
• 让厂家附 10 种丝氨酸蛋白酶交叉报告，Granzyme A、C、K 必须 <0.05 %
• 收到盒后自测 50 ng/mL Granzyme A，读数 0 pg/mL，才签字验收

5. 批间差：一次买三批，中心点做交叉

• 订购 3 个批次，每批抽 1 套试剂，混合测 4 个质控样本
• CV>8 % 写邮件给技术支持，要求免费替换或补偿
• 把批号写进纸质记录，后期发文章审稿人要查，缺失就补实验

6. 运输温控：干冰 VS 冰袋的 8 % 活性差

• 夏天快递车厢 42 °C，冰袋化尽后 Granzyme B 标准品活性掉 8 %
• 选干冰运输，箱内放温度记录仪，曲线超 8 °C 就拒收
• 收到后立刻复溶测最高浓度 OD，对比出厂质检报告，下降 >10 % 拍照留证

7. 价格换算：每 1000 次检测的真实成本

• 把复孔、标准品重复、裂解液稀释都算进去，60 元/样本的 B 盒反而最便宜
• 预算申请书直接写“单样本综合成本”，财务一眼看懂，砍价空间锁定

8. 售后响应：24 h 内给出实验方案

• 写邮件列 4 张图：标准曲线、空白孔、裂解液样本、异常 OD
• 厂家 24 h 内不回复，直接拉黑，换另一家代理
• 把售后速度写进采购评分表，占 20 % 权重，避免低价中标后无人理