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小鼠白介素-12 p70 ELISA 选购指南:把 CLMF p35 假货挡在门外的七关过滤

2025-09-10

01 抗体对验证:p35 与 p40 亚基必须同时锁住

IL-12 p70 是 p35+p40 异源二聚体,市面上混进单抗 p40 的试剂盒会把 p80 同源二聚体也算进去。

要求厂家提供双抗体对表位映射:

  • 捕获抗 p35 克隆 9A5,识别 23–36 aa
  • 检测抗 p40 克隆 C8.6,识别 219–232 aa

两段序列在 p80 同源二聚体上空间距离 4 nm,无法形成三明治,交叉 < 0.1 %

让厂家出具肽段竞争报告,没有就果断放弃,省得后续数据被审稿人质疑。

02 溯源证书:NIBSC 95/544 编码必须写在 COA

IL-12 国际标准品 95/544 每支 10 000 IU/mL,正规试剂盒用其赋值。

COA 上要有:

  • 标准品批号
  • 对应 IU 值
  • 稀释方程

缺一项就说明企业只用自建标准,批次间差可达 30 %

把 COA 拍照存 PDF,投稿时附在补充材料,编辑部一看编号就放行。

03 动态范围:哮喘模型 50–5 000 pg/mL 一条曲线搞定

OVA 激发小鼠支气管灌洗液里 IL-12 p70 基线 80 pg/mL,24 h 掉到 40 pg/mL,LPS 刺激血清峰值 4 200 pg/mL

选购时要求标曲覆盖 15–6 000 pg/mL,样本无需稀释,回收率 95 %–105 %

厂家官方曲线最高 2 000 pg/mL 的盒子直接淘汰,省得买回去再加稀释步骤。

04 样本兼容性:EDTA 血浆与肝素血浆差 12 %

肝素血浆里 IL-12 与血小板结合,离心 3 000 g 回收率只有 88 %

EDTA 螯合钙离子,血小板不激活,回收率 100 %

选购前看说明书“样本类型”一行,没写 EDTA 的直接跳过

实验室已有肝素血浆,用 1 % Triton X-100 裂解血小板,回收率拉回 98 %,但背景 OD 涨 0.01,需要额外空白对照。

05 板条拆封:8 连条与 12 连条成本差 25 %

96T 整板价格 1 400 元,折合 14 元/孔

8 连条拆封款 1 050 元,用多少拆多少,平均 11 元/孔

做动物时间梯度 6 个点,加标曲 8 孔,64 孔就够,8 连条剩下 4 条放回铝箔袋,干燥剂加 3 g,封口夹热封 3 s,4 °C 放 6 周活性无损失

整板款拆封后 4 周未用完,EC50 漂移 8 %,只能报废

06 售后条款:CV > 8 % 能否无条件退换

合同里写死:

  • 板内 CV > 8 %
  • 回收率 < 85 %
  • 交叉 > 2 %

满足任一条即免费退换,物流费厂家承担

把条款拍照发采购部,防止供应商口头承诺,出问题 3 天解决,不耽误毕业答辩

07 价格梯度:一级代理 vs 电商直营差 30 %

KET7011 一级代理年框价 1 050 元,电商旗舰店 1 400 元,差 30 %

年框要求季度采购 4 盒,凑不够可与隔壁组拼单,物流均摊

电商大促 6 18 降到 1 200 元,但不含技术支持,新手第一次买建议走代理,送上门培训 2 h,省得曲线跑歪浪费样本