IL-12 p70 是 p35+p40 异源二聚体,市面上混进单抗 p40 的试剂盒会把 p80 同源二聚体也算进去。
要求厂家提供双抗体对表位映射:
两段序列在 p80 同源二聚体上空间距离 4 nm,无法形成三明治,交叉 < 0.1 %
让厂家出具肽段竞争报告,没有就果断放弃,省得后续数据被审稿人质疑。
IL-12 国际标准品 95/544 每支 10 000 IU/mL,正规试剂盒用其赋值。
COA 上要有:
缺一项就说明企业只用自建标准,批次间差可达 30 %
把 COA 拍照存 PDF,投稿时附在补充材料,编辑部一看编号就放行。
OVA 激发小鼠支气管灌洗液里 IL-12 p70 基线 80 pg/mL,24 h 掉到 40 pg/mL,LPS 刺激血清峰值 4 200 pg/mL
选购时要求标曲覆盖 15–6 000 pg/mL,样本无需稀释,回收率 95 %–105 %
厂家官方曲线最高 2 000 pg/mL 的盒子直接淘汰,省得买回去再加稀释步骤。
肝素血浆里 IL-12 与血小板结合,离心 3 000 g 回收率只有 88 %
EDTA 螯合钙离子,血小板不激活,回收率 100 %
选购前看说明书“样本类型”一行,没写 EDTA 的直接跳过
实验室已有肝素血浆,用 1 % Triton X-100 裂解血小板,回收率拉回 98 %,但背景 OD 涨 0.01,需要额外空白对照。
96T 整板价格 1 400 元,折合 14 元/孔
8 连条拆封款 1 050 元,用多少拆多少,平均 11 元/孔
做动物时间梯度 6 个点,加标曲 8 孔,64 孔就够,8 连条剩下 4 条放回铝箔袋,干燥剂加 3 g,封口夹热封 3 s,4 °C 放 6 周活性无损失
整板款拆封后 4 周未用完,EC50 漂移 8 %,只能报废
合同里写死:
满足任一条即免费退换,物流费厂家承担
把条款拍照发采购部,防止供应商口头承诺,出问题 3 天解决,不耽误毕业答辩
KET7011 一级代理年框价 1 050 元,电商旗舰店 1 400 元,差 30 %
年框要求季度采购 4 盒,凑不够可与隔壁组拼单,物流均摊
电商大促 6 18 降到 1 200 元,但不含技术支持,新手第一次买建议走代理,送上门培训 2 h,省得曲线跑歪浪费样本