瘦素浓度在 0.5–50 ng/ml 区间,标曲高端 OD 需冲到 2.8。卤素灯 700 h 后光强衰减 10 %,高端值掉到 2.5,低值样本被整体拉低 8 %。提前把灯编号贴到仪器侧面,700 h 一到直接换,成本 180 元,比重做 90 份样本便宜 20 倍。
瘦素检测常拆 6 联条,剩余孔放回铝袋。干燥剂吸湿后质量增加,低于 1 g 说明失效,湿度 60 % 时板条 48 h 内失水 0.2 μl,背景 OD 升高 0.02。用 0.1 g 精度秤称重,干燥剂 0.9 g 直接整袋报废,别心疼几块钱。
血清瘦素检测常跑 35 循环洗板,管道内壁长菌后脱落,空白孔背景从 0.03 升到 0.08。每周五灌入 0.5 % 次氯酸,静置 16 h,周六纯化水回冲 20 min,菌落数降到 < 10 CFU/ml,背景稳在 0.03。
带冷却酶标仪的热电块,硅脂干裂后温控误差 ±2 °C,低温实验瘦素标曲斜率漂移 5 %。拆下模块,酒精棉擦净旧脂,涂 0.1 mm 新品,误差缩到 ±0.3 °C,批间 CV 从 8 % 回到 4 %。
瘦素健康人血清 2 ng/ml 处于标曲底端。移液器 O 型圈老化后 5 μl 吸液只出 4.6 μl,浓度被低估 12 %。每月用十万分之一天平点检 10 μl 和 50 μl 两点,误差 > 1 % 直接换圈,成本 15 元,比丢数据划算。
TMB 光照 2 h 产生淡蓝色背景,瘦素低值样本易被掩盖。每两周取 200 μl 底物读 650 nm,OD ≥ 0.03 整瓶报废,背景从 0.06 降到 0.02,省下重做标准品的时间。
瘦素标准品解冻记录带 UTC 时间戳,电脑时区错设成太平洋时间,LIMS 误判标准品已过期 16 h,拒绝上传。把 BIOS 时间设为本地时区,关闭自动设置,审计时直接甩截图,不用写偏差报告。
每块测样板预留 A1–H1 8 孔跑应急标曲,当原始标曲出现 Hook 或高端塌陷,立即启用救援板计算,86 份血清无需重做。救援板与主标曲偏差 < 5 %,审计官直接签字放行。