1. 灵敏度不是最小读数，是 95 % 置信区间下限

说明书常见“<2 pg/mL”只是把零标准重复 20 次平均+2SD。

• 真正注册检要求 60 例零浓度基质检出假阳性 ≤1 例，换算后功能灵敏度 3.1 pg/mL。
• 让厂家提供 3 批试剂盒、3 天、3 台酶标仪的原始 OD，把 95 % 分位值写进报告，审评员不再发补。

2. 交叉反应列表要具体到“氨基酸片段”

IFN-γ 与 IL-10、IL-22 同属 II 类细胞因子家族，螺旋 Bundle 区 30 % 同源。

• 参数表必须写明“与 IL-10 交叉 <0.02 %，实验浓度 50 ng/mL”。
• 若只写“无交叉”而无浓度上限，发补概率 100 %；把 10 种相关因子各 100 ng/mL 的实测 OD 附表，一次性通过。

3. 回收率区间 80–120 % 太宽，做窄才能过线性挑战

注册检要求 3 份血清各加 3 个浓度，覆盖 8–1000 pg/mL。

• 把 80–120 % 缩到 90–110 %，每 20 pg/mL 一档，线性回归斜率 0.98–1.02，审评不再要求稀释线性补充实验。

4. 钩状效应验证浓度写进“技术参数”栏

IFN-γ 血清峰值可达 50 ng/mL，普通 Kit 只验证 10 ng/mL。

• 参数栏直接印刷“Hook 验证至 100 ng/mL，回收 >80 %”，临床高剂量样本无需二次稀释确认，节省 2 周验证时间。

5. 批间差用“斜率比”代替 CV

四参数拟合曲线斜率 a 值批间差异 <5 %，比末端 CV 更能反映真实漂移。

• 让厂家把 10 批 COA 的斜率 a 做成折线图附在 IFU 附录，审评员一眼可判稳定。

6. 校准品溯源链写进“硬件规格”

IFN-γ 首个 WHO 国际标准 82/587 已停产，继任品 21/358 活性 6500 IU/ampoule。

• 参数表写明“每 1 ng 校准品相当于 6.5 IU，溯源 21/358”，临床实验室可直接换算 IU 上报，无需自建换算公式。

7. 酶标仪波长差 2 nm，OD 掉 7 %

TMB 450 nm 峰宽 30 nm，滤光片半带宽 10 nm 时，中心波长 448 nm 与 452 nm 相比 OD 差 7 %。

• 技术参数里加一条“适用于 450 ±2 nm 滤光片，偏差 >2 nm 需用校准因子 1.07 修正”，不同实验室数据可对齐。

8. 冻融稳定性写“实测值”而非“建议”

说明书常见“避免反复冻融”，注册资料需要硬数据。

• 把校准品冻融 1×、3×、5× 的实测浓度直接列表，5× 后偏差 <8 %，可写进“技术参数”栏，用户-20 °C 分装 50 μL 放心用。

9. 板内差控制限：0.1 OD 以上才有效

低浓度 OD 0.05 时，10 % CV 对应绝对差 0.005，酶标仪重复误差已 0.003。

• 参数表写明“定量下限 OD≥0.1”，保证 CV 是真·生物重复，不是仪器噪声。

10. 样本体积写入“精密度公式”

血清用量 50 μL 与 100 μL，两者信噪比差 1.4 倍，直接影响功能灵敏度。

• 在精密度公式里注明“以 50 μL 血清为基础，体积减少至 25 μL 时，功能灵敏度升至 4.5 pg/mL”，让微量样本用户提前有数。