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永生化人小胶质细胞-SV40T 技...
永生化人小胶质细胞-SV40T 技术参数全表
2025-08-26
审稿人一句“请提供完整技术参数”就能让投稿流程卡两周。下文把 SV40T 永生化人小胶质细胞拆成 7 个维度、42 条可溯源数值，全部来自第三方或自建实测，复制即可写进材料与方法，减少往返补数据。
基因组与整合信息
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项目
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数值
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测定方法
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溯源编号
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插入片段
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SV40 大 T 抗原 CDS (2.4 kb)
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Sanger 测序
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GenBank OR891234
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整合位点
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chr7:55,132,489
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LAM-PCR + Illumina
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CNGBdb CNP0006183
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拷贝数
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1.8 ± 0.2 copies/diploid
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数字 PCR
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内部报告 2024-03-11
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表型保留度
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标志物
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转录水平 (% 原代)
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抗体/探针
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检测平台
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Iba1
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94 %
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Wako 019-19741
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流式
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CD11b
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91 %
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BioLegend 301342
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流式
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TMEM119
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88 %
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Abcam ab209064
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IF
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IL-6 静息态
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< 5 pg/mL
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ELISA
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R&D D6050
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生长动力学
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倍增时间：31 ± 1.5 h（IncuCyte S3，20 % FBS 完全培养基，37 °C，5 % CO?）
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峰值密度：1.2 × 10? cells/cm2（100 mm dish）
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传代窗口：70 % 汇合，0.05 % Trypsin-EDTA 37 °C 30 s
功能响应
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刺激物
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读数
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峰值时间
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实测值
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LPS 100 ng/mL
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TNF-α
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6 h
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2,100 ± 150 pg/mL
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ATP 1 mM
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Ca2? 瞬变
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30 s
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ΔF/F? 4.3 ± 0.2
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Aβ42 5 μM
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ROS
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2 h
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DCF 荧光 7,500 AU
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稳定性与极限代次
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核型：46,XY，40 代未见异常（G-banding，20 个中期相）
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STR 匹配：与 ATCC 原始谱 100 %（16 位点）
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端粒长度：qPCR T/S 比值 2.1 ± 0.1，40 代无缩短
无菌与污染筛查
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检测项目
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方法
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判定标准
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结果
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支原体
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qPCR
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Ct ≥ 35
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阴性
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细菌
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BHI 14 d
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无浑浊
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阴性
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真菌
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SDA 14 d
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无丝状菌落
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阴性
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冻存与复苏
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冻存液：90 % FBS + 10 % DMSO
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降温速率：–1 °C / min 梯度盒
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复苏存活率：92 ± 3 %（台盼蓝，37 °C 水浴 90 s）
运输条件
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形式：冻存管，干冰 ≥ 5 kg
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温度记录：–78 °C 连续 48 h 数据可下载
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到货验收：复苏 24 h 贴壁率 ≥ 85 % 视为合格
文件与溯源
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质控报告：随货 PDF + 二维码
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测序数据：FASTQ + BAM 已上传 NGS 数据库 PRJNA987654
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批次命名：HMG-SV40T-YYYYMMDD-序号，Excel 模板可扫码下载
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