实验室里每一次细胞复苏，都是一次成本与时间的博弈。选错细胞株，意味着三个月的实验周期、数万元试剂全部作废。下面这份指南，把采购决策拆成七个可落地的比对维度，直接给出可验证的实操方法，避免踩坑。

01 细胞来源与伦理合规

原始组织溯源

要求供应商出具《组织来源声明》原件，确认样本来自合法器官捐献或手术残余组织，并附带 IRB（机构审查委员会）批准号。可在美国 NIH RePORTER 数据库中输入批准号核验真伪。缺失这一文件，文章投稿阶段极易被审稿人质疑伦理合法性。

SV40 大 T 抗原转染方式

早期文献多用逆转录病毒包装法，后期多采用慢病毒或 PiggyBac 转座系统。慢病毒系统整合位点更分散，基因组稳定性高；逆转录病毒易在启动子区域插入，可能导致表型漂移。索取病毒载体图谱，核对 LTR 序列与 GEO 数据库中已上传的转录组数据是否匹配，可排除“挂名”细胞株。

02 质量检测证书深度解读

STR 图谱匹配度

收货当天做 16 位点 STR，与 ATCC、DSMZ 公开数据比对，匹配阈值 ≥ 90 %。低于该值，表明存在交叉污染或早期传代错误。将原始电泳图存档，投稿时期刊可能要求提供数字指纹文件。

支原体检测报告

要求供应商提供荧光法（Hoechst 33258）与 PCR 双阴性结果。实验室自检时，推荐 Lonza MycoAlert 化学发光法，灵敏度 50 CFU/mL，5 min 出结果。发现阳性立即丢弃，SV40 永生化细胞对支原体异常敏感，清除后再转染成功率不足 30 %。

平滑肌特异性标志物

qPCR 检测 α-SMA、SM22α、Calponin 的 mRNA 水平，与新鲜分离原代细胞对比，表达量下降幅度 ≤ 20 % 视为合格。必要时加做 Western blot，抗体选用 Sigma A2547（α-SMA）单克隆，避免批次差异。

03 运输条件与到货验收

干冰 vs 液氮蒸汽运输

液氮蒸汽运输存活率更高，但成本翻倍。干冰运输需 ≤ 48 h，到货时干冰余量 ≥ 2 kg。现场拍照记录包装状态，运输温度记录器数据导出存档。若温度高于 –60 °C 超过 10 min，可拒收并索赔。

复苏存活率现场测定

到货后 30 min 内复苏，台盼蓝计数存活率 ≥ 85 %。低于该值，直接启动售后流程，避免后续实验失败无据可依。

04 价格模型与隐藏成本

单价≠总成本

细胞株报价从 3000 元到 8000 元不等，关键看附带项目：STR、支原体、标志物检测是否打包。单独外包三项检测费用约 2500 元，打包价更划算。另需计算运输险：液氮运输险率 3 %，干冰 1.5 %，货值高时不可忽视。

售后条款

明确“传代 3 代内出现非人为污染可全额退款”。部分供应商仅提供等量替换，实验窗口一旦错过，替换细胞已无意义。

05 供应商分级与谈判策略

第一梯队

ATCC、ECACC、ScienCell，细胞库本身具备 STR 数据库，溯源清晰。议价空间有限，可争取免费加做一次支原体抽检。

第二梯队

国内省级细胞库、高校共享平台。价格下浮 20 %–30 %，需自行送检 STR，适合预算有限的课题组。

样品试用

谈判时要求 1 × 10^5 细胞试用装，附赠完整检测报告。试用成功后再签大单，降低风险。

06 合同与数据共享

数据追溯条款

在采购合同中加入“原始 STR 图谱、支原体检测报告、病毒载体全序列”作为技术附件。供应商拒绝提供，可视为红旗信号。

发表权与 MTA

确认细胞株是否受《材料转移协议》限制。部分 ATCC 株要求发表前需书面通知，未遵守可能导致法律纠纷。

07 到货后首周验证清单

1. 复苏 24 h 后拍照记录细胞形态，异常贴壁或漂浮比例 > 10 % 即启动售后。
2. 第 1、3、5 代分别留样冻存，防止后期表型漂移无原始备份。
3. 建立独立批次号系统，命名规则：IHSSMC-SV40-YYYYMMDD-批次序号，避免实验室内部混淆。