购买前索取完整 STR 报告与 SNP 指纹图,确认原始批次源自 C57BL/6 雄性成鼠膀胱穹隆上皮,SV40 LT 与 hTERT 插入位点分别为 Chr4qD2 与 Chr11qB5,拷贝数为单拷贝,无随机整合导致的染色体大片段缺失。批次编号应与 ATCC、ECACC 或国内 CCTCC 数据库可溯源,拒绝无编号或编号不可查的“实验室自用”产品。
官方推荐配方为 Keratinocyte-SFM 基础液 + 2% B27 + 0.2 ng/mL EGF + 5 ng/mL FGF2 + 0.5 μg/mL hydrocortisone + 5 μg/mL insulin + 5 μg/mL transferrin + 50 μg/mL gentamicin。部分供应商提供“即用型”套装,内含 500 mL 基础液与一次性冻干添加剂,避免实验室自行称量误差。若套装缺失任何组分,需在采购清单中单独补货,防止到货后无法立即复苏。
商业库通常以 P3-P5 代冻存发货,复苏后活性 ≥90 % 为放行标准。要求供应商提供“复苏后 24 h 贴壁率”原始照片与台盼蓝计数原始数据,拒绝仅以文字描述“活性良好”的批次。若实验周期超过 30 代,选择附带“>50 代稳定性报告”的批次,报告中应包含每 10 代的倍增时间曲线、核型图与端粒长度 Southern blot。
规格 | 细胞量 | 运输介质 | 温度要求 | 签收后处理时限 |
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冻存管 | 1×10? cells | 90 % FBS + 10 % DMSO | 干冰 -78 ℃ | 72 h 内复苏 |
T25 活瓶 | 2×10? cells | 完全培养基 5 mL | 室温 15-25 ℃ | 4 h 内入箱 |
活瓶运输费用高但复苏周期短,适合急需原代数据的课题;冻存管运输成本低,可长期储备,适合平行多组实验。下单时勾选“全程温控记录”,签收时核对 PDF 温度曲线,异常波动 >5 ℃ 直接拒收。
渠道 | 冻存管单价 | 额外服务 | 隐性费用 |
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国内代理 | 800-1200 元 | 免费复苏指导 | 快递干冰费 200 元 |
海外直邮 | 150-200 美元 | 英文 COA、MSDS | 关税 13 %、干冰续重 3 USD/kg |
打包合同 | 10 管起 7 折 | 代存液氮 1 年 | 年度液氮费 500 元 |
大量采购可议价至 6 折并要求赠送 1 mL 即用型培养基试用装,减少首次复苏失败风险。
合同内写明“7 天内质量问题包退换”,并附检测方法:复苏 24 h 贴壁率 <85 % 或支原体 PCR 阳性即可触发退换。要求供应商提供电子版 STR 原始图谱、支原体 PCR 原始凝胶图、COA 与批次追溯表,拒绝仅提供纸质复印件。若用于体内移植,还需确认细胞系已通过 IACUC 无害评估,避免伦理审查被卡。