BRITER细胞系简介

BRITER细胞系是一种经过基因改造的永生化细胞系，主要用于研究骨形态发生蛋白（BMP）信号转导。该细胞系通过将小鼠颅骨成骨细胞进行永生化改造，并在其基因组中整合了BMP反应元件（BRE）驱动的萤火虫荧光素酶（FFLuc）基因和SV40启动子驱动的海肾荧光素酶（RRLuc）基因。FFLuc活性可响应BMP信号而增加，RRLuc基因则作为内部参照，减少因细胞增殖等因素引起的非特异性激活假阳性。此外，通过添加4-羟基他莫昔芬可增强细胞对外源性BMP信号的敏感性。

永生化机制

BRITER细胞系的永生化是通过敲除小鼠颅骨成骨细胞中的Bmp2和Bmp4基因，并利用他莫昔芬诱导系统实现的。这种条件性敲除使得细胞能够在特定条件下进行永生化，同时保留一定的成骨特性。细胞的永生化还可能涉及其他基因的改变，如端粒酶逆转录酶（TERT）的表达，从而延长端粒，维持细胞的增殖能力，不过具体机制尚需进一步研究。

报告基因系统

BRITER细胞系的报告基因系统是其核心特征之一。细胞基因组中整合的BRE-FFLuc基因使得细胞能够对BMP信号做出响应，当BMP信号激活时，FFLuc的表达增加，可通过荧光素酶活性检测来量化BMP信号的强度。RRLuc基因的表达相对稳定，作为内部对照，用于校正细胞数量等非特异性因素对FFLuc活性的影响，从而提高检测的准确性。

实验应用

BRITER细胞系在BMP信号转导研究中具有重要应用价值。它可以用于高通量筛选，寻找能够激活或抑制BMP信号的小分子化合物，为骨再生和相关疾病的治疗提供潜在的药物候选。此外，该细胞系还可用于研究BMP信号在细胞增殖、分化、凋亡等过程中的具体作用机制，以及与其他信号通路的相互作用。

细胞使用与保存

BRITER细胞系为贴壁生长的多极细胞，适合在特定培养基中培养。细胞的传代操作需要注意控制胰酶消化时间和吹打力度，避免产生过多气泡影响细胞状态。细胞系以冻存管形式运输和保存，复苏时需遵循一定的操作流程，以确保细胞的活性和稳定性。