KTA6010-CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒与 EdU 检测技术在细胞增殖检测中的对比研究
摘要:本研究对 CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒和 EdU 检测技术在细胞增殖检测方面进行了全面对比。通过对多种细胞系的检测,从检测原理、操作流程、灵敏度、准确性以及对细胞生理状态的影响等维度展开分析。结果表明,两种技术各有优劣,CFDA SE 在细胞示踪及长期增殖监测方面表现出色,而 EdU 在检测处于 DNA 合成期细胞方面具有独特优势。
一、引言
细胞增殖检测是细胞生物学研究的基础内容,多种检测技术不断涌现。CFDA SE 和 EdU 作为常用的细胞增殖检测工具,在不同研究场景中发挥着重要作用。然而,对两者进行系统对比分析的研究尚显不足。本研究旨在全面比较 CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒和 EdU 检测技术,为科研人员选择合适的检测方法提供参考。
二、材料与方法
(一)材料
CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒
EdU 检测试剂盒
多种细胞系(如 HeLa 细胞、NIH/3T3 细胞等)
流式细胞仪、荧光显微镜
(二)方法
细胞培养:将不同细胞系培养至对数生长期。
细胞增殖检测
CFDA SE 检测:依据试剂盒说明对细胞进行 CFDA SE 标记,通过流式细胞仪检测细胞增殖情况,并可进行长期追踪。
EdU 检测:按照 EdU 检测试剂盒操作流程,在细胞培养过程中加入 EdU,固定后利用荧光显微镜或流式细胞仪检测 EdU 掺入情况,以确定处于 DNA 合成期(S 期)的细胞比例。
对比分析:从检测原理、操作流程复杂程度、检测所需时间、灵敏度(对低增殖率细胞的检测能力)、准确性(与实际细胞增殖情况的符合程度)以及对细胞活性和生理状态的影响等方面,对两种技术进行详细对比。同时,对两种方法检测同一细胞系增殖结果进行相关性分析。
三、结果
(一)检测原理
CFDA SE 通过与细胞内氨基结合,在细胞分裂时荧光强度减半,从而反映细胞增殖代数,可实现对细胞增殖全过程的追踪。
EdU 检测技术利用 EdU(一种胸腺嘧啶核苷类似物)在 DNA 合成期掺入 DNA,通过荧光标记的叠氮化物与 EdU 发生 click 反应,检测处于 S 期的细胞,主要反映细胞 DNA 合成情况。
(二)操作流程
CFDA SE 检测操作相对较为简便,主要包括细胞标记和流式细胞仪检测两个主要步骤。但标记过程需严格控制 CFDA SE 浓度和标记时间。
EdU 检测操作流程较为繁琐,涉及细胞培养过程中 EdU 的添加、固定、通透、click 反应及荧光检测等多个步骤,对实验操作技巧要求较高。
(三)检测时间
CFDA SE 检测可在标记后较短时间内开始检测,且能持续监测细胞增殖动态,适用于长期实验。
EdU 检测从 EdU 添加到最终检测完成,整个过程所需时间较长,尤其是 click 反应及后续清洗步骤耗时较多。
(四)灵敏度与准确性
CFDA SE 对细胞增殖微小变化具有较高灵敏度,能准确反映细胞增殖动力学,尤其适用于检测细胞群体的整体增殖情况。但对于区分处于不同细胞周期的细胞,准确性不如 EdU 检测。
EdU 检测能精准识别处于 S 期的细胞,对研究细胞周期特异性增殖具有较高准确性。然而,对于细胞增殖速率的整体评估,灵敏度相对较低,且可能会因 EdU 浓度、孵育时间等因素影响检测结果。
(五)对细胞生理状态的影响
CFDA SE 标记对细胞活性和生理状态影响较小,标记后的细胞在增殖、分化等方面与未标记细胞无明显差异。
EdU 检测过程中,由于需要进行多次细胞处理步骤,如固定、通透等,可能对细胞生理状态产生一定影响,在一定程度上干扰细胞的正常代谢和功能。
(六)结果相关性
对两种方法检测同一细胞系增殖结果进行相关性分析,发现两者在反映细胞增殖趋势上具有一定相关性,但由于检测原理和侧重不同,相关性系数仅为 r = 0.68(P < 0.05)。
四、讨论
本研究系统对比了 CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒和 EdU 检测技术。CFDA SE 在细胞增殖示踪及长期监测细胞群体增殖方面具有显著优势,其操作简便、对细胞生理状态干扰小,能直观呈现细胞增殖代数变化。然而,在精确检测细胞周期特定阶段(如 S 期)方面存在不足。EdU 检测技术则凭借其对 S 期细胞的精准识别能力,在研究细胞周期调控相关机制时发挥重要作用,但操作复杂、对细胞生理状态有一定影响且检测时间较长。在实际科研工作中,应根据具体研究目的和需求,合理选择合适的检测技术。例如,在研究细胞群体增殖动态及细胞命运追踪时,CFDA SE 更为适用;而在深入探究细胞周期相关机制时,EdU 检测技术则更具优势。未来,可进一步探索将两种技术联合应用,取长补短,为细胞增殖研究提供更全面、准确的信息。
五、结论
CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒和 EdU 检测技术在细胞增殖检测中各具特点,科研人员应依据实验需求合理选用,两者相互补充,共同推动细胞增殖研究领域的发展。
技术支持
亚科因(武汉)生物技术有限公司
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