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Adiponectin 选购指南:把 30 kDa 的多面手一次买对

2025-10-24

命名迷宫:Adiponectin 到底有几个货号

  • 文献出现 ADP、Acrp30、ApM1、GBP28 都是同一蛋白,订购时优先用 "Adiponectin" 做关键词
  • 基因符号 ACDC、APM1 常用于核酸试剂,蛋白商品名极少带这些后缀
  • 人源、小鼠、大鼠序列同源性 83 %,跨物种做实验必须选同源蛋白,否则 ELISA 信号掉 70 %

全长 vs 球状域:功能决定长度

  • 全长 244 aa 三聚体用于代谢研究,可激活 AMPK 磷酸化
  • 球状域 gAd 104 aa 专做心肌保护,浓度低至 50 ng/mL 就能减少梗死面积 30 %
  • 胶原域缺失突变体不能形成六聚体,SEC 表现为 90 kDa 单峰,价格却便宜 20 %,别因省钱买错

来源差异:HEK293 与大肠杆菌的糖型鸿沟

  • HEK293 表达带有羟基化赖氨酸与 C1Q 球状折叠,高聚体占比 60 %
  • 大肠杆菌无糖基化,蛋白以三聚体为主,体内半衰期 0.5 h,适合短期脉冲实验
  • 做动物实验优先选 CHO 来源,糖链接近人源,免疫原性低,小鼠皮下注射 1 mg 无炎症浸润

标签取舍:His 还是 Fc

  • C 端 6×His 便于 IMAC 一步纯化,标签分子量 1 kDa,几乎不影响活性
  • Fc 融合二聚体可提高血清稳定性,半衰期拉到 12 h,但分子量翻倍,价格贵 40 %
  • 若做表面等离子体实验,His 标签可直接固定在 NTA 芯片,节省生物素化步骤

纯度红线:SEC-HPLC 单体 ≥ 95 %

  • 多聚体每增加 1 %,AMPK 激活 EC50 右移 5 %,剂量曲线无法重复
  • 还原 SDS-PAGE 重链 30 kDa 条带外出现 60 kDa 二聚体带,说明样品曾被氧化
  • 要求 COA 附带 NR-CE-SDS 图,重链纯度 ≥ 98 %,轻链杂带 ≤ 0.5 %

批次间差:把 CV 压到 5 % 以内

  • 一次锁定 3 批大包装,混样后测 AMPK 激活曲线,EC50 RSD ≤ 5 % 视为合格
  • 自留 100 μg 金标管,-80 °C 保存,新到货先跑平行 ELISA,回收率 90-110 % 方可入库
  • 记录每批糖型比例,G0F 差异 > 3 % 直接退货,防止高聚体活性漂移

包装规格:冻干 vs 液体

  • 冻干 10 μg 小瓶适合细胞实验,一次用不完易受潮,开盖后 4 °C 仅稳 7 天
  • 液体 100 μg 支装免稀释,-80 °C 可存 24 个月,适合动物长期实验
  • 同一货号不同剂型价差 15 %,按实验周期选剂型,避免反复冻融带来 2 % 聚集体

运输温度:干冰重量 ≥ 200 g

  • 夏季运输箱内温度记录条峰值 8 °C 以上立即拍照拒收
  • 液体剂型收到后 10 min 内转 -80 °C,延迟 30 min 聚集体增加 0.3 %
  • 冻干粉回温 25 °C 再开盖,防止冷凝水吸入导致局部浓度过低

价格陷阱:按 μg 还是按 kDa

  • 某些平台按 90 kDa 三聚体摩尔报价,折算下来单 μg 贵 1.8 倍
  • 统一换算到 "每 μg 单体蛋白",再比较运费与关税
  • 大宗 1 mg 以上可签 CIF 实验室条款,清关时间从 12 天缩到 4 天

文件包:审计四件套

  • COA、MSDS、原产地证、TSE/BSE 声明缺一不可
  • 若用于 IND 申报,再要糖型图谱与病毒清除验证
  • 电子版预审通过后再下单,缺少任何一页都会导致申报延迟