流式细胞实验室、核心试剂厂商、IVD 注册部在讨论 IgG4 检测系统时，最终都会落到同一页 Excel：技术参数。数值写错一位，临床性能报告直接退回重审。下面把 IGHG4 相关试剂、质控品、校准品与配套设备的关键参数拆成四大板块，逐条给出测试方法、接受标准与常见踩坑点，方便直接写进采购 URS 或注册资料。

1. 线性区间与灵敏度

常见失败原因：试剂缓冲液里 Tween-20 超过 0.05 % 会拉高本底，LoD 瞬间飙到 0.02 g/L 下不去。

2. 精密度与准确度

注意：若采用鼠单抗体系，HAMA 阳性样本会把偏差拉到 +12 %，需要在说明书中声明“当 HAMA>150 ng/mL 时结果可能高估”。

3. 特异性与交叉反应

• IgG1 交叉：≤0.3 %
• IgG2 交叉：≤0.2 %
• IgG3 交叉：≤0.1 %
• IgA、IgM、IgE 交叉：均 ≤0.05 %

验证方法：把每种干扰蛋白配到 10 g/L，用待测体系回算 IgG4 浓度，结果必须低于 LoQ。多数国产试剂在 IgG1 项翻车，原因是捕获抗体采用鼠抗人 IgG-Fc 通用克隆，不能识别铰链区 G4m(a) 异型。

4. 校准品与质控品参数

4.1 校准品

• 定值不确定度 ≤±3 %（k=2）
• 瓶间差 CV ≤1 %（随机 10 瓶）
• 含防腐剂 ≤0.1 % ProClin300，避免荧光标记淬灭
• 赋值溯源链：一级标准 NIBSC 67/086 → 工作校准品 → 试剂盒校准品，至少三级

4.2 质控品

• 高、中、低 3 水平：0.08 / 0.8 / 3.2 g/L
• 开瓶稳定性 7 天 2–8 °C，偏差 ≤±5 %
• 冻干品复溶后 CV ≤2 %

5. 设备端硬件参数

6. 软件与数据参数

• 定标曲线拟合：四参数 Logistic，R2≥0.995
• 报警阈值：相对残差 >±10 % 自动拒标
• 数据导出：支持 ASTM 与 HL7，字段需含“IgG4 亚类” Loinc 代码 33702-3
• 审计追踪：21 CFR Part 11 合规，修改记录留痕 ≥5 年

7. 稳定性与运输

• 试剂 2–8 °C 开封稳定性：28 天偏差 ≤±5 %
• 37 °C 加速 7 天：信号下降 ≤8 %（等同于 12 个月实时）
• 运输跌落：1 m 自由跌落 3 次，瓶口无裂纹，蛋白浓度变化 ≤2 %
• 冻融耐受：?20 °C ? 室温 3 循环，无肉眼沉淀，CV ≤3 %

8. 安全与环保

• 防腐剂 ProClin300 浓度 ≤0.1 %，MSDS 第 3 节须标注“对水生生物毒性类别 2”
• 废液 pH 6.5–8.0，可直接入医院污水处理系统；含 NaN? 的废液需单独桶装
• 校准品含人源组分，HBV、HCV、HIV 核酸检测阴性报告随货同行

9. 文档与注册

• 注册单元：IgG4 测定试剂盒（免疫比浊法）需提交 3 家临床试验 1200 例数据
• 参考区间：20–40 岁健康人群 0.03–1.95 g/L（CLSI C28-A3）
• 说明书页脚必须打印 G4m 异型抗体克隆号，例如“克隆 HP6025，识别 G4m(a) 抗原表位”