1. 先厘清需求：重组蛋白还是抗体配对？

• 趋化实验：优先选无动物源、低内毒素重组蛋白，浓度梯度 1–100 ng/mL 即可观测中性粒细胞迁移。
• ELISA/Luminex：需要高亲和捕获抗体与检测抗体配对，注意与 CXCL1/2 交叉反应率 <0.5 %。
• IHC/IF：组织切片里 CXCL3 表达弱，选高敏兔单克隆，抗原表位靠近 C 端 α 螺旋，避免 N 端易降解区。

2. 表达系统决定钱包厚度

• E.coli：产量高、成本低，售价 100 μg 约 800–1200 元；无糖基化，活性与天然差异肉眼难辨，适合体外趋化。
• HEK293：真核糖基化，血清半衰期长 1.8 倍，售价翻倍；做小鼠体内炎症模型更稳，预算充足再考虑。
• 无动物源 CHO：临床前安全性报告可直接引用，每 100 μg 报价 3000+，适合申报 IND 阶段。

3. 标签取舍：His 还是 Tag-free？

• His 标签：纯化得率高，镍柱一步搞定；做晶体或 NMR 需切标签，额外花费凝血酶 200 U 成本。
• Tag-free：Native 序列，体内实验更可信；纯化步骤多 2 步，厂家会把成本转嫁给用户，溢价 30 %。

4. 活性单位如何对标？

• 看 EC50 而不是广告页写的“bioactivity”。
• 用经典 Transwell 法：中性粒细胞 5×10? / 孔，上腔 300 μL，下腔 600 μL，37 ℃ 1 h，EC50 应在 5–15 ng/mL。
• 若厂家只写“active”而无数值，要求 COA（Certificate of Analysis），不提供直接淘汰。

5. 包装规格与分装策略

• 常规 10 μg、50 μg、100 μg 三档。
• 做剂量响应曲线选 10 μg×5 支独立包装，避免反复冻融；做动物模型直接买 500 μg 大包装，单价降 25 %。
• 自带分装管优于整管，每管 20 μL 预分，减少实验室手套污染概率。

6. 冻干 vs 液体：运输温度陷阱

• 冻干：常温运输，收到后 4 ℃保存 24 个月；复溶后一次性用完最佳，剩余液体液氮速冻可再撑 2 周。
• 液体：–80 ℃干冰运输，运费 200 元起；到货直接放–80 ℃，活性无损失，适合没冻干设备的实验室。

7. 证书与批次追溯

• 要求提供 SDS-PAGE、SEC-HPLC、内毒素、生物活性四张图，缺一张就换供应商。
• 批次号与库存管身激光雕刻一致，拍照留档；发文章时审稿人会查。

8. 售后与技术支持

• 问清是否 24 h 内响应技术邮件；CXCL3 做 ELISA 出现高背景，厂家能远程协助优化封闭液配方。
• 承诺活性问题 7 天包换，来回运费卖方承担，写进采购合同。

9. 价格横向对比实例

10. 下单前的最后核对清单

• [ ] 确认序列与 UniProt P19876 完全一致，无额外 N 端 Met
• [ ] 内毒素 ≤0.1 EU/μg
• [ ] 提供生物活性 EC50 具体数值与检测方法
• [ ] 包装支持分装，标签可选
• [ ] 售后条款写进合同