1. 校准品溯源链：WHO 96/538 到实验室 IU 值

IGF-1 国际单位 1 IU = 0.1 μg，WHO 96/538 是唯一可得固体标准。试剂盒把溯源页写进 COA，斜率 0.98–1.02、截距 ±0.5 μg/L 才算合格。缺这条数据，多中心研究换算系数会漂 8%，文章返修时只能重新测全部样本。

2. 检测下限与功能灵敏度是两回事

厂商常把 0.02 μg/L 作为“检出限”，用的是缓冲液+3SD 算法。换成血清后，基质蛋白把背景抬高，功能灵敏度实际 0.15 μg/L。采购单要求写明“血清功能灵敏度”，并附 6 次独立实验 CV ≤20% 的数据，才能覆盖儿童血清 0.5–2 μg/L 的低值区间。

3. 线性范围与稀释回收

成人血清 IGF-1 浓度 5–40 μg/L，肢端肥大症可冲到 200 μg/L。试剂盒标 300 μg/L 上限，却常漏写稀释线性。用 1:10 稀释液回收率 <90% 就证明高剂量钩状。选附带 4 点稀释验证报告的款，回收率 90–110%，省得自己再花两天做线性。

4. 抗体特异性：是否识别 IGF-2 与胰岛素

IGF-1 与 IGF-2 同源 62%，与胰岛素同源 40%。交叉反应率写 0.05% 看似漂亮，但 IGF-2 生理浓度是 IGF-1 的 3 倍，实际干扰可达 0.15 μg/L。索要交叉曲线，选 IGF-2 500 μg/L 时表观 IGF-1 <0.1 μg/L 的抗体对，低值样本才稳。

5. 糖化 IGF-1 识别能力

血清里 5–8% IGF-1 被糖化，糖化位点在 Lys68。传统单抗抓 30–40 区段不受影响，识别 60–70 区段的会漏掉糖化分子。试剂盒注明“识别糖化型”能把糖尿病人群浓度差从 ?12% 拉到 ?3%，避免临床被投诉“结果偏低”。

6. 平台转移系数：化学发光 vs 质谱

ID-LC-MS/MS 是仲裁方法，化学发光法 slope 0.94–1.06 才算可接受。采购时让厂家附带 100 例血清 Passing-Bablok 回归，斜率落在外部就拒收。多中心项目统一平台，否则 8 μg/L 诊断切点会漂到 7.2–8.8 μg/L，直接改写参考区间。

7. 校准频率与稳定性

液体校准品 2–8 °C 开瓶 30 天活性掉 6%，冻干品复溶后 8 h 内用掉。写 SOP：每次实验前用高、低质控各 1 点确认校准，偏差 >5% 就重校。把校准曲线斜率自动截图附在原始记录，审计官直接打勾。

8. 板内/板间 CV 验收

厂家标板内 CV 3% 用的是缓冲液样本。自己用 3 μg/L、15 μg/L、35 μg/L 血清做 10 复孔，板内 CV ≤5%、板间 CV ≤8% 才签字验收。把数据贴在冰箱门，下一批试剂到货先对比，超标立即退货，避免整批数据被质疑。

9. 设备参数匹配表

• 化学发光：需要 450 nm 触发、630 nm 发射，读数窗口 1 s/孔，PMT 电压 800 V，灯源寿命 1 000 h，LED 模组可拉到 10 000 h。
• 微孔板：高结合力透明板，发光本底 ≤150 RLU，白底板能把信号提高 25%，但交叉 talk 增加 0.3%，选带黑色边框的款。
• 洗板机：注液量 300 μL/孔，残留量 <2 μL，用 0.05% Tween-20 洗 4 次，能把游离抗体降到 0.1 fmol，背景发光再降 40 RLU。

10. 环保与废液

底物液含 0.02% 过氧化氢与 0.05% Proclin 300，混合后 pH 7.4，可直接下水道。校准品加有 0.02% 叠氮钠，收集后用 10% 漂白粉氧化 30 min 再弃。发光板用 70% 乙醇浸泡后回收，重复利用 3 次，读数 RLU 衰减 <5%，不影响低值样本判断。