分子量陷阱：成熟 18 kDa 与前体 24 kDa 活性差 100 倍

目录写“18 kDa”默认是 caspase-1 剪切后的成熟形式。拿到 24 kDa 前体，ED50 从 2 ng/mL 飙到 200 ng/mL，活性掉两个量级。下单前让厂商提供 SDS-PAGE 还原图，确认 18 kDa 条带占比 ≥95 %，否则退回重发。

活性单位换算：NIBSC 93/566 每支 5000 IU = 50 ng

WHO 参比品 93/566 标定 5000 IU/支，对应成熟 IL-18 50 ng，换算 1 IU = 0.01 ng。自己标定 TF-1/IL-18R 报告基因，ED50 0.05 ng/mL，与官方一致即可。活性低于 8000 IU/μg 直接判批次不合格，别心软。

内毒素硬核：0.05 EU/μg 是小鼠体内红线

IL-18 诱导 IFN-γ 分泌，阈值 1 μg/只。内毒素 0.1 EU/μg 时，小鼠血清 IFN-γ 背景升到 500 pg/mL，完全掩盖 IL-18 效应。要求重组 C 因子法 ≤0.05 EU/μg，比凝胶法贵 20 美元，一次通过体内实验，省 30 只小鼠。

糖型占座：E.coli 无糖版半衰期 0.8 h

CHO 表达 IL-18 在 N39、N52 带复杂糖，小鼠半衰期 2.3 h；E.coli 无糖版 0.8 h。急性炎症模型选无糖，成本低 30 %；做持续阻断选糖基化版，减少频繁补针。目录不写糖型，直接索要 LC-MS 糖谱，给不出就换品牌。

聚集体红线：SEC-HPLC 主峰 ≥95 %

IL-18 疏水核裸露，37 ℃放置 24 h 聚集体升到 8 %，活性掉 50 %。到货立即跑 SEC-HPLC，主峰 <95 % 直接退货。储存缓冲液加 0.2 M 精氨酸，聚集体月升率 <1 %，活性维持 95 % 以上。

冻干 VS 液体：冻干复溶损失 5 %，液体反复冻融损失 30 %

冻干品用 10 mM HCl + 0.1 % CHAPS 复溶，损失 5 %；液体品 –80 ℃冻融 3 次，聚集体升到 12 %，活性掉 30 %。长期储存选冻干，一周用完选液体，别图方便买大包装液体，用不完就是浪费。

受体结合率：IL-18Rα 结合常数 KD 0.3 nM

SPR 实测 IL-18 与 IL-18Rα 结合 KD 0.3 nM，低于 0.5 nM 批次的细胞活性 ED50 同步升高。要求厂商附 SPR 传感图，KD >0.5 nM 直接淘汰，避免买到“高亲和假货”。

包装规格算法：10 μg 小包装最省

体外实验 EC50 5 ng/mL，96 孔板每孔 100 μL 只需 0.5 ng，10 μg 可跑 2 万块孔，价格 120 美元。100 μg 大包装单价比小包装便宜 20 %，但复溶后 4 ℃只能放 7 天，用不完报废。按通量下单，小包装反而便宜。

运输温度盲区：干冰运输导致蛋白表面冻伤

IL-18 液体走干冰，温度 –78 ℃，表面水分子升华，形成玻璃态微裂纹，复溶后聚集体升到 6 %。选常温运输冻干款，聚集体 <1 %，活性无差异。急着要货选干冰，到货立即测 SEC-HPLC，聚集体 >3 % 就让厂商签赔偿协议。

售后响应红线：48 h 内提供 COA、SEC-HPLC、SPR 图

下单前把“48 小时内提供 COA、SEC-HPLC、SPR 传感图”写进合同，超时扣 10 % 货款。厂商普遍能答应，真超时邮件催一次，附件当天就到。没写进合同，催三次才给，实验窗口已被耽误两周。