亚型定位：先问实验到底需不需要 IgG1

流式、ELISA、免疫沉淀、治疗性抗体工程……不同场景对 IgG1 的“刚性需求”差异巨大。把 IgG1 当万能钥匙买，往往多花 30 % 预算却换来交叉反应。先写三行实验概要：样本物种、检测平台、是否需要 Fc 段功能。写不清这三点，继续往下看只会越看越晕。

克隆号迷宫：同一抗原 200+ 克隆怎么筛

抗体公司目录里，IgG1 克隆号后面常跟“-3G2、-5H1”这类尾巴。它们不是版本号，而是亚克隆差异。真·诀窍是先把文献里出现频次前 10 的克隆号扔进 PubMed，用“host species + application”二次检索，看 5 年内有没有人报导过非特异条带。只要有一篇流式文章指出“背景高”，立刻拉黑。剩下 2–3 个克隆再进入下一轮。

表位与修饰：别让磷酸化位点藏在 IgG1 身后

IgG1 本身不识别表位，但它决定了实验窗口。以抗磷酸化抗体为例，如果表位紧邻 Pro-Gly 片段，选 IgG1 亚型时常出现“肽段构象遮蔽”，Western 背景干净却条带弱。换成 IgG2a 或敲除 Fc 的 IgG1 变体，信号能翻 3 倍。解决方法是向厂家索要“epitope mapping peptide array”报告，确认识别序列不含柔性 Gly 重复。要不到报告？直接换品牌。

宿主物种陷阱：小鼠 IgG1 还是大鼠 IgG1

同一亚型，不同宿主，价格差一倍。小鼠 IgG1 在人源样本里背景低，但做大鼠模型时，抗小鼠二抗会狂飙背景。反过来，大鼠 IgG1 在小鼠组织里同理。多物种实验直接选“重组兔 IgG1”或“人源化 IgG1”，省掉二抗交叉烦恼。预算卡死？买 0.5 mg 小包装做预实验，背景不合格立刻止损。

Fc 工程版本：ADCC、CDC 功能要不要

体外诊断多数场景只认 Fab，Fc 像“沉默乘客”。一旦进入治疗性抗体或体内中和实验，FcγR 结合力决定半衰期和细胞毒性。野生型 IgG1 Fc 亲和力高，可能引起意外细胞杀伤。现在主流供应商提供三档 Fc 沉默突变：LALA、DANA、YTE。LALA 最便宜，YTE 半衰期最长，价差不低于 40 %。把实验终点写清楚：只做体外阻断选 LALA；要做小鼠体内半衰期，直接上 YTE，省得二次购买。

包装规格算法：mg 数不是越大越省

重组 IgG1 每 mg 活性在 4 °C 下按月衰减，厂商给的 36 个月有效期是–80 °C 数据。流式每周用 2 次，每次 0.25 μg，买 100 μg 小包装刚好 2 个月用完，避免反复冻融。Western 一抗稀释度 1:1000，每膜 10 mL 工作液，单次消耗 10 μg，一年 50 张膜就是 0.5 mg。算清消耗曲线再下单，大包装单价低但报废风险高，综合成本反而贵。

批次平行测试：一次 Western 锁定未来三年

选定克隆后，一次性买 3 个相邻批次，同一凝胶平行跑样。曝光后灰度值差异＞8 %，说明批次间存在显著差异，这个品牌直接淘汰。灰度差＜5 %，把合格批次编号写进实验室 SOP，后续订单强制要求同一批号。多数厂商愿意预留 1 年批次，写邮件时附上 SOP 截图，成功率 90 % 以上。

隐形费用：运输干冰和关税谁埋单

IgG1 冻干粉看似常温即可，但部分 Fc 工程化蛋白要求干冰运输，境外订单 2 kg 干冰附加费 120 美元。进口关税 HS 编码 3002.13，关税 3 %、增值税 13 %，一套下来溢价 16 %。提前让销售把运输条款写成“DDP 门到门”，费用锁死，合同里隐藏的小字才不会变成月底的惊吓。

售后响应红线：48 小时不给 COA 直接退货

重组 IgG1 每批都必须有 SDS-PAGE、SEC-HPLC、 endotoxin 三份报告。下单前把“48 小时内提供 COA”写进采购邮件，超时即触发无条件退货。别等实验做到一半发现内毒素 5 EU/mg，细胞实验全军覆没，再扯皮就晚了。