一、选购前的基本认知

1.1 细胞系的来源与特性

永生化人类正常皮肤细胞 - hTERT 是通过将人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因导入原代皮肤细胞制备而成，使其获得在体外无限增殖的能力，同时保持正常细胞的遗传背景和功能特性。

1.2 细胞系的应用领域

这种细胞系广泛应用于皮肤生物学研究、药物开发、化妆品安全性评估等领域，可用于研究皮肤细胞的生长、分化、衰老机制，以及测试药物对皮肤细胞的影响。

二、细胞系供应商的选择

2.1 供应商的信誉与资质

选择具有良好信誉和相关资质认证的供应商，如细胞库或专业细胞供应商。这些供应商通常会对细胞系进行严格的鉴定和质量控制，确保细胞系的纯度、活性和特性符合要求。

2.2 细胞系的详细信息

供应商应提供细胞系的详细信息，包括细胞系的来源、生长特性、培养条件、传代次数等。这些信息对于研究人员正确使用和保存细胞系至关重要。

2.3 细胞系的质量保证

了解供应商提供的质量保证措施，如细胞系的纯度检测、活性检测、支原体检测等。选择经过严格质量控制的细胞系，以确保实验结果的可靠性。

三、细胞系的培养与保存

3.1 培养基的选择

根据细胞系的要求选择合适的培养基，通常是含有特定营养成分和生长因子的 DMEM 或 MEM 培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）和 1% 青霉素 / 链霉素溶液。

3.2 培养条件的控制

细胞培养需要在 37℃、5% CO?、95% 空气的条件下进行，保持培养基的 pH 值稳定，确保细胞的正常生长。

3.3 细胞的冻存与复苏

冻存时，将细胞收集并制成单细胞悬液，加入含 5% DMSO 的冻存液中，轻轻混匀后分装于冻存管，放入 - 80℃冰箱中预冻，24 小时后转入液氮罐中长期保存。复苏时，从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃水浴中快速解冻，待细胞悬液完全解冻后，立即转移到含有适量预热培养基的离心管中，低速离心后去除上清，用新鲜培养基重悬细胞并接种到培养瓶中进行培养。

四、细胞系的实验验证

4.1 细胞生长曲线的绘制

接种细胞后，定期观察细胞的生长情况，绘制细胞生长曲线，以评估细胞的增殖能力和生长特性。

4.2 细胞功能的检测

通过检测细胞的特定功能，如胶原蛋白的分泌、细胞外基质的合成等，验证细胞系的功能特性。

4.3 细胞的遗传稳定性检测

定期对细胞系进行遗传稳定性检测，如染色体核型分析，确保细胞系在长期培养过程中保持遗传背景的稳定性。