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谷草转氨酶(AST/GOT)活性检测:技术参数与应用解析
2025-05-29
谷草转氨酶(AST/GOT)的生理功能与临床意义
谷草转氨酶(AST/GOT)是一种关键的转氨酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,在氨基酸代谢中发挥重要作用:
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氨基酸代谢的关键酶:AST 催催化谷氨酸和 α- 酮戊二酸之间的氨基转移反应,生成草酰乙酸和谷氨酸。这一反应在氨基酸的分解代谢和糖异生过程中具有重要意义。草酰乙酸可以进一步进入三羧酸循环,为细胞提供能量。
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肝脏和心肌损伤的敏感指标:AST 在肝脏和心肌细胞中含量丰富。正常情况下,血液中 AST 活性较低。当肝细胞或心肌细胞受损时,如在肝炎、肝硬化、心肌梗死和心肌炎等疾病中,AST 大量释放入血,血清 AST 活性显著升高,是临床上诊断肝脏和心肌疾病的重要指标。
CheKine? 谷草转氨酶(AST/GOT)活性检测试剂盒(微量法)的检测原理
亚科因生物的 CheKine? 谷草转氨酶(AST/GOT)活性检测试剂盒(微量法)采用酶联比色法,通过 NADH 氧化速率反映 AST 活性:
酶联反应体系
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AST 的催化反应:AST 催化谷氨酸和 α- 酮戊二酸反应,生成草酰乙酸和谷氨酸。此反应需要辅酶 NAD?参与,将 α- 酮戊二酸氧化为 α- 羟戊二酸,同时 NAD?被还原为 NADH。
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乳酸脱氢酶的偶联催化:草酰乙酸在乳酸脱氢酶作用下还原为苹果酸,同时 NADH 被氧化为 NAD?。NADH 的生成量与 AST 活性呈正比关系。
比色反应的定量基础
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340 nm 波长的选择依据:NADH 在 340 nm 处具有特征吸收峰,而 NAD?在该波长处吸收极弱。通过高精度酶标仪测量 340 nm 处吸光度的变化速率,可实现对 AST 活性的动态监测。
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线性范围与灵敏度优化:试剂盒的线性检测范围为 0.5 - 25 U/L,相关系数 R2≥0.99,最低检测限可达 0.1 U/L,满足从血清到组织提取液等多种样本的检测需求。
反应条件的精细控制
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pH 与温度的优化组合:反应体系采用磷酸盐缓冲液(pH 7.2 - 7.4),配合 37°C 孵育条件,确保 AST 在不同来源样本中的活性得以稳定表达,同时避免非特异性反应。
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抗干扰组分的优化设计:反应体系允许加入常见代谢物(如谷胱甘肽、柠檬酸等),模拟真实生物体系中的代谢环境,确保检测结果的生物学相关性。
应用拓展:AST 活性检测的多领域解决方案
基于 CheKine? 谷草转氨酶(AST/GOT)活性检测试剂盒的高精度与广泛适用性,该产品在多个领域展现出卓越的应用价值:
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肝脏疾病研究:在慢性乙型肝炎患者中,血清 AST 活性显著升高,与肝脏炎症活动度呈显著正相关(R2=0.81)。通过动态监测 AST 活性,可评估抗病毒治疗的疗效。例如,恩替卡韦治疗后,患者血清 AST 活性从 120 U/L 降至 35 U/L,肝脏炎症活动度显著减轻。
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心肌损伤的辅助诊断:在急性心肌梗死患者中,血清 AST 活性在发病后 6 - 12 小时开始升高,24 - 48 小时达到峰值,与心肌损伤程度呈显著正相关(R2=0.87)。AST 活性检测可作为心肌梗死的辅助诊断指标,为临床诊断和治疗提供重要依据。
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药物诱导肝损伤研究:在药物研发过程中,检测发现某新型抗生素在高剂量组小鼠中引起血清 AST 活性升高 3.8 倍,表明该药物具有潜在的肝毒性。通过优化药物结构,降低肝毒性,为新药研发提供了关键数据支持。
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临床医学中的应用:在临床诊断中,AST 活性检测用于评估肝功能和心肌状态,辅助诊断肝脏和心肌疾病。例如,在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者中,血清 AST 活性显著高于正常人群,与肝脏脂肪变性程度呈显著正相关(R2=0.75),为疾病的早期诊断和病情监测提供了重要依据。