在生物医学研究领域，细胞增殖和毒性检测是评估细胞状态、药物效果以及生物材料生物相容性的关键环节。传统的检测方法往往存在操作繁琐、灵敏度低或对细胞有毒性等局限。SuperKine? 超敏型细胞增殖检测试剂（CCK-8）以其独特的优势，为科研工作者提供了一种高效、灵敏且操作简便的检测方案。

一、CCK-8 检测原理：揭秘细胞活性的钥匙

CCK-8 检测试剂的核心成分是高度水溶性的四唑盐 WST-8。在细胞内脱氢酶的作用下，WST-8 被还原生成橙色的水溶性甲瓒产物。这一反应与细胞代谢活性紧密相关，活细胞数量越多，产生的甲瓒产物也越多，其颜色越深。通过比色测定，可在 450 nm 波长下准确测量吸光度，进而定量分析细胞增殖情况或评估细胞毒性。

与传统四唑盐（如 MTT、XTT、MTS 或 WST-1）相比，CCK-8 的检测灵敏度显著提高，能够检测到更少量的细胞增殖变化，这使其在低细胞密度或增殖缓慢的细胞系检测中表现出色。同时，CCK-8 试剂具有良好的水溶性，避免了 MTT 等试剂在使用过程中可能出现的沉淀问题，确保了检测结果的准确性和重复性。

二、操作流程：简便快速的检测体验

细胞准备与接种

根据实验需求，将细胞悬液接种于合适的培养板中。对于贴壁细胞，使用胰蛋白酶消化并计数后，以适当密度接种；悬浮细胞则直接接种。细胞数量依据实验目的而定，一般每孔 10^3 - 10^4 个细胞是常见起始密度。

试剂添加与孵育

待细胞贴壁或稳定悬浮后，按照试剂盒说明，向每孔加入相应量的 CCK-8 试剂。孵育时间依据细胞种类和实验目的而定，通常为 1 - 4 小时。孵育过程在常规细胞培养箱（37℃、5% CO?）中进行，无需特殊设备。

检测

孵育结束后，使用酶标仪在 450 nm 波长下测量吸光度，部分酶标仪需扣除 630 nm 处的背景吸光度，以提高检测准确性。若无酶标仪，也可使用普通分光光度计，但需确保比色皿光程一致且操作规范。

三、应用领域：多场景的科研助力

CCK-8 检测试剂广泛应用于细胞增殖研究，可用于评估细胞在不同营养条件、生长因子或药物刺激下的增殖能力。在细胞毒性检测中，通过检测药物处理后细胞的代谢活性变化，CCK-8 可有效评估化合物的潜在毒性。此外，CCK-8 还适用于高通量筛选，在药物研发中高效筛选大量化合物，快速确定具有期望活性的候选药物。

四、优势与注意事项：确保实验成功的关键

优势

• 高灵敏度：CCK-8 对细胞增殖变化的检测灵敏度高于传统方法，能更精准地反映细胞生长状态，尤其适用于低细胞密度或增殖缓慢的细胞系。
• 操作简便：无需特殊设备或复杂操作流程，仅需简单的细胞培养和比色测定步骤，即可完成检测。
• 水溶性佳：避免了 MTT 等试剂的沉淀问题，减少了操作中的误差，提高了检测结果的可靠性。
• 兼容性强：与多种常用的细胞培养基和试剂兼容，不影响细胞正常生理状态，可在常规细胞培养条件下进行检测。

注意事项

• 孵育时间优化：根据细胞类型和实验目的优化孵育时间，确保甲瓒产物生成量与细胞数量呈线性关系。建议进行预实验确定最佳孵育时间。
• 避免光照：CCK-8 试剂和生成的甲瓒产物对光敏感，操作过程中应尽量避光，以防止光对检测结果产生影响。
• 细胞状态监测：在实验过程中，定期观察细胞的生长状态和形态变化，确保细胞处于良好的生理状态。若发现细胞出现异常，应及时调整实验条件。
• 试剂保存：CCK-8 试剂应严格按照试剂盒说明书的要求保存，通常为避光、2 - 8℃保存，避免试剂失效或活性降低。