在哺乳动物细胞培养领域，RPMI-1640 完全培养基以其卓越的性能和广泛的适用性脱颖而出。本文将深入探讨 RPMI-1640 完全培养基的配方、应用以及操作使用要点。

一、RPMI-1640 完全培养基的配方与特点

RPMI-1640 是由 Moore 等人于 1967 年在 Roswell Park Memorial Institute 开发的细胞培养基，是改进型的 McCoy's 5A 培养基，使用碳酸氢盐缓冲系统。RPMI-1640 完全培养基在基础成分上添加了 10% 胎牛血清和 1% 双抗（青霉素 - 链霉素溶液）。这种配方为细胞提供了全面的营养支持和保护。

即用型配方

RPMI-1640 完全培养基（含 10% 血清，1% 双抗）经过精心配制，无需额外添加成分，开瓶即可直接用于细胞培养。这种即用型设计大大简化了实验前的准备工作，减少了因配制培养基带来的误差和污染风险。特别适合那些对时间敏感的实验和需要快速启动培养的场景。

营养全面

RPMI-1640 培养基本身含有丰富的营养成分，包括各种氨基酸、维生素、矿物质和葡萄糖。10% 胎牛血清的添加进一步丰富了培养基中的生长因子和细胞黏附因子，支持细胞的快速增殖和健康生长。1% 双抗成分则有效抑制细菌和真菌的生长，降低培养过程中的污染风险。

二、RPMI-1640 完全培养基的应用范围

广泛适用于多种细胞类型

RPMI-1640 完全培养基适用于多种哺乳动物细胞的培养，包括 Jurkat、MCF-7、PC-12、PBMC、星型胶质细胞和肿瘤细胞等。它尤其适用于悬浮细胞的培养，为这些细胞提供了理想的生长环境，促进细胞的旺盛生长和稳定传代。

满足多种研究和生产需求

在生物医学研究中，RPMI-1640 完全培养基被广泛用于细胞的长期培养、基因转染、药物筛选等实验。在生物制药领域，它为重组蛋白表达和疫苗生产提供了稳定的培养平台。

三、RPMI-1640 完全培养基的操作使用方法

储存与准备

RPMI-1640 完全培养基应保存在 4℃左右的低温环境中，避免光照直射和温度波动过大。在使用前，将培养基从冰箱中取出，使其恢复至室温，以确保细胞在接种时不会因温度骤变而受到应激。

细胞培养步骤

1. 细胞接种：根据细胞类型和实验需求，将细胞以适当的密度接种到培养容器中。对于贴壁细胞，可以使用培养瓶、培养皿或培养板；对于悬浮细胞，通常使用摇瓶或悬浮培养袋。
2. 培养条件：将接种后的细胞放入细胞培养箱中，设置温度为 37℃，湿度保持在 95% 以上，二氧化碳浓度为 5% 左右。这些条件有助于维持培养基的 pH 值稳定，为细胞提供一个适宜的生长环境。
3. 定期换液：根据细胞的生长速度和代谢需求，定期更换培养基，一般每 2 - 3 天更换一次。换液时，吸出旧的培养基，用适量的 PBS 或无菌生理盐水轻轻冲洗细胞，再加入新鲜的 RPMI-1640 完全培养基。
4. 观察与记录：在细胞培养过程中，定期使用倒置显微镜观察细胞的形态和生长状态，记录细胞的生长曲线和分裂情况。注意观察细胞的贴壁情况、细胞密度和细胞形态是否正常。

冻存与复苏

当细胞生长达到实验要求的密度或状态时，可以进行冻存。冻存时，使用含 10% DMSO 的冻存培养基，将细胞悬浮液分装到冻存管中，放入程序降温盒中逐步降温，最终保存于液氮罐中。复苏时，将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴中快速解冻，然后将细胞悬液转移到培养容器中，加入新鲜的 RPMI-1640 完全培养基，继续培养。

传代操作

对于贴壁细胞，当细胞生长达到 80% - 90% 汇合度时，可以使用胰蛋白酶进行消化，按照适当的比例进行传代。对于悬浮细胞，直接稀释细胞悬液进行传代。传代比例根据细胞类型和实验需求确定，一般为 1:2 - 1:10。

四、RPMI-1640 完全培养基的优势与注意事项

优势

• 广泛适用性：适用于多种哺乳动物细胞培养，特别是悬浮细胞。
• 营养全面：含有丰富的营养成分和生长因子，支持细胞的快速增殖和健康生长。
• 即用型配方：无需额外添加成分，开瓶即用，节省时间，减少污染风险。
• 成本效益：提供多种成分组合的细胞培养基，满足各类需求。

注意事项

• 储存条件：严格控制储存温度和环境，避免反复冻融。
• 血清选择：选择高质量的胎牛血清，以确保细胞生长和实验结果的可靠性。
• 定期评估：定期评估培养基的性能和细胞的生长状态，必要时更换培养基或调整培养条件。