在细胞培养领域,支原体污染一直是令人头疼的问题。支原体污染可能导致细胞代谢异常、生长减缓甚至实验结果偏差。传统检测方法要么耗时漫长,要么灵敏度欠佳。而发光法支原体检测试剂盒的出现,为这一难题带来了高效解决方案。
发光法支原体检测试剂盒基于萤火虫 luciferase 酶的生物发光反应。支原体细胞含有固醇,这是区别于其他细菌的显著特征。试剂盒利用这一特性,通过特定的化学反应,使 luciferase 酶与支原体细胞相互作用,产生光信号。这种光信号的强度与支原体数量成正比,通过高灵敏度的光检测仪器,可以精确定量支原体的存在。
相比之下,传统培养法需要在特殊培养基上等待数天甚至数周才能观察到支原体生长,而 PCR 法虽较快,但对实验环境和操作人员要求极高,稍有不慎就可能引入污染,导致假阳性结果。发光法试剂盒则巧妙避开了这些问题,操作简便且结果直观,成为细胞培养中支原体检测的新宠。
使用发光法支原体检测试剂盒,首先需要准备细胞样本。对于贴壁细胞,先用胰蛋白酶消化,收集细胞悬液后离心,弃上清,用PBS洗涤细胞,去除残留培养基成分。悬浮细胞则直接离心收集细胞沉淀,同样用PBS洗涤。然后将细胞重悬于适量裂解液中,充分裂解细胞释放支原体。
接下来,按照试剂盒说明书,将裂解后的细胞样本与反应液混合。反应液中含有 luciferase 酶和其他必要试剂。将混合好的样本放入化学发光检测仪中,设置好参数后启动检测。一般 10 - 15 分钟内便可得到检测结果。若样本中有支原体,试剂盒会发出相应强度的光信号,通过仪器可精确读取数值并判断是否污染。
整个操作过程简单快捷,无需复杂仪器设备,普通实验室即可轻松开展。而且试剂盒稳定性好,只要按要求保存和操作,多次实验结果重复性佳,为细胞培养污染监测提供了可靠保障。
发光法支原体检测试剂盒在细胞培养领域有着广泛的应用。在细胞系开发阶段,可用于快速筛选支原体污染的细胞株,确保后续实验的可靠性。细胞治疗产品研发过程中,支原体检测是必不可少的质量控制环节,发光法试剂盒以其高效精准的特点,完美契合这一需求。
生物制药生产中,细胞培养过程需严格监控支原体污染,发光法试剂盒可实现快速、频繁的检测,及时发现污染隐患,避免因污染导致的生产损失。不仅如此,对于细胞库的建立和保存,发光法支原体检测试剂盒也是理想的检测工具,能有效保证细胞库的纯净性,为细胞资源的长期保存和利用提供保障。